24小时热门版块排行榜    

查看: 2090  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yishinianhua

木虫 (正式写手)

[求助] 为什么我的超滤离心管不浓缩

如题,我买的Milipore的Amicon-Ultra 15 分子量是10KDa的,将菌液上清加入超滤离心管有膜的那个小管,然后放到离心机里面3000g 离心了20分钟,但是拿出来的时候没有任何变化,完全没有浓缩。不知道是怎么回事?

为什么我的超滤离心管不浓缩
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yishinianhua

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by muchong5577 at 2016-12-20 09:34:37
同意5楼的说法,建议提高转速。菌液上清直接过超滤管不好吧,一般我们是得到纯化的蛋白,想甩掉多余的水分,同时也除去一些分子量不同的蛋白才使用。

目前我们还不清楚目的蛋白的分子量,就是想通过超滤离心管把不同分子量的物质大致分开、检测它们的作用,进而找到目的蛋白。各位大神有什么好方法吗,求指教!
8楼2016-12-20 10:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

sss2172014

木虫 (小有名气)

上清杂质太多了,完全就是堵掉了,滤膜完全堵死。这个玩意儿是浓缩蛋白用的。你想想,你菌液上清中得有多少远远大于15KD的东西,甚至肉眼不见的颗粒。你试试0.22的滤膜过滤一下,一样堵死。

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-12-20 01:47:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yishinianhua

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sss2172014 at 2016-12-20 01:47:18
上清杂质太多了,完全就是堵掉了,滤膜完全堵死。这个玩意儿是浓缩蛋白用的。你想想,你菌液上清中得有多少远远大于15KD的东西,甚至肉眼不见的颗粒。你试试0.22的滤膜过滤一下,一样堵死。
...

我已经用滤膜过滤一遍了,而且里面只加水都过滤不下来。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-12-20 08:40:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sss2172014

木虫 (小有名气)

全新的,滤水都不行?再管一个试试?也不行的话那这批管子有问题啊

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-12-20 08:57:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 17/850 2026-08-14 17:48 by 启萌科技
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +21 医学老男孩 2026-08-13 47/2350 2026-08-14 17:26 by gdd2018
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +4 Ldrop2023 2026-08-13 4/200 2026-08-14 14:50 by Tide man
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +5 cratir 2026-08-14 9/450 2026-08-14 12:25 by 医学老男孩
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
信息提示
请填处理意见