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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 260/280 数值低
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赵一霏

新虫 (初入文坛)

[求助] 260/280 数值低 已有2人参与

我提去的是病毒的RNA(PRRSV)然后测得的比值都是1.56左右！想问问这可能是哪步操作出了问题，然后，RNA浓度太低，我应该注意哪些问题！谢谢啦！

@飞约疯人院 @biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-12-09 21:40:43
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-10 09:03:08
有蛋白质，和苯酚残留，氯仿可以多加一步，洗两次。浓度低的话，尽量多样本。

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
2楼2016-12-09 23:22:05
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小蘑菇cc

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-10 09:03:23
氯仿抽提两次 乙醇洗的时候轻轻的弹起沉淀尽量洗的彻底一些 冬天气温低可以适当考虑延长晾干时间

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

赵一霏
3楼2016-12-10 00:19:30
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赵一霏

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小蘑菇cc at 2016-12-10 00:19:30
氯仿抽提两次 乙醇洗的时候轻轻的弹起沉淀尽量洗的彻底一些 冬天气温低可以适当考虑延长晾干时间

感谢之前的回复，我加入乙醇之前，试管底部，我肉眼没有看到沉淀，这个可能是我哪一步出错了呢！下面是我的实验步骤！请大神指点！
260/280 数值低



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4楼2016-12-11 10:38:12
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王王王超超超

新虫 (初入文坛)
可能是液氮研磨时出现问题，研钵要遇冷。

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5楼2016-12-11 20:09:42
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pyj809132105

新虫 (小有名气)
260:280低，那是加氯仿离心后吸上清可能吸到蛋白了，少吸一些上清液尽量不要碰壁也不要碰界面层就会好些

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6楼2016-12-11 20:34:03
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小蘑菇cc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 赵一霏 at 2016-12-11 10:38:12
感谢之前的回复，我加入乙醇之前，试管底部，我肉眼没有看到沉淀，这个可能是我哪一步出错了呢！下面是我的实验步骤！请大神指点！

...

沉淀少有可能是取的研磨后的样品过少 适当增加样品用量 并且增加异丙醇静置时间 不过没有沉淀也没关系 应该不会影响比值……还有加完trizol我们一般只用力摇 不用振荡器 你可以试试

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7楼2016-12-12 13:41:39
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