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赵一霏

新虫 (初入文坛)

[求助] 260/280 数值低 已有2人参与

我提去的是病毒的RNA(PRRSV)然后测得的比值都是1.56左右!想问问这可能是哪步操作出了问题,然后,RNA浓度太低,我应该注意哪些问题!谢谢啦!

@飞约疯人院 @biostar2009 发自小木虫Android客户端
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sky蒲公英

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-10 09:03:08
有蛋白质,和苯酚残留,氯仿可以多加一步,洗两次。浓度低的话,尽量多样本。

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知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
2楼2016-12-09 23:22:05
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小蘑菇cc

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-10 09:03:23
氯仿抽提两次 乙醇洗的时候轻轻的弹起沉淀尽量洗的彻底一些 冬天气温低可以适当考虑延长晾干时间

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2016-12-10 00:19:30
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赵一霏

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小蘑菇cc at 2016-12-10 00:19:30
氯仿抽提两次 乙醇洗的时候轻轻的弹起沉淀尽量洗的彻底一些 冬天气温低可以适当考虑延长晾干时间

感谢之前的回复,我加入乙醇之前,试管底部,我肉眼没有看到沉淀,这个可能是我哪一步出错了呢!下面是我的实验步骤!请大神指点!
260/280 数值低



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4楼2016-12-11 10:38:12
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王王王超超超

新虫 (初入文坛)

可能是液氮研磨时出现问题,研钵要遇冷。

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5楼2016-12-11 20:09:42
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pyj809132105

新虫 (小有名气)

260:280低,那是加氯仿离心后吸上清可能吸到蛋白了,少吸一些上清液尽量不要碰壁也不要碰界面层就会好些

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6楼2016-12-11 20:34:03
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小蘑菇cc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 赵一霏 at 2016-12-11 10:38:12
感谢之前的回复,我加入乙醇之前,试管底部,我肉眼没有看到沉淀,这个可能是我哪一步出错了呢!下面是我的实验步骤!请大神指点!

...

沉淀少有可能是取的研磨后的样品过少 适当增加样品用量 并且增加异丙醇静置时间 不过没有沉淀也没关系 应该不会影响比值……还有加完trizol我们一般只用力摇 不用振荡器 你可以试试

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7楼2016-12-12 13:41:39
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