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萧晓1993银虫 (小有名气)
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实时荧光PCR绘制标准曲线出现问题 已有1人参与
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各位大神,我是使用的AbI7300实时荧光定量PCR仪器进行目的基因的标准曲线绘制,采用SBBR-Green荧光染料,按10倍进行梯度稀释,反反应体系配制: 1、每孔体系 20µL primer-F1 0.4 µL primer-R1 0.4 µL SYBR Green Master(ROX) 12 µL ddH2O 7.2 µL 2、PCR 扩增程序:95℃预变性10min;95℃ 10s,60℃ 1min,以此进行 45 个循环;反应结束。 由下面的图感觉很奇怪,就是第一个1:100倍的稀释度的时候,曲线突然往下走了?还有溶解曲线有杂峰,说明是有引物二聚体,应该怎样解决呀?求大神们指教 2016-11-26-1.jpg 2016-11-26tm2.jpg@biostar2009 |
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10楼2016-11-28 07:47:11
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-27 22:22:49
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-27 22:22:49
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2楼2016-11-27 12:39:27
萧晓1993
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
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- 散金: 30
- 帖子: 160
- 在线: 98.4小时
- 虫号: 4157986
- 注册: 2015-10-19
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
3楼2016-11-27 14:22:31
4楼2016-11-27 19:58:10










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萧晓1993