24小时热门版块排行榜    

查看: 3131  |  回复: 8

上官abc

金虫 (正式写手)

王下七武海

[交流] 分子量太大的蛋白怎么纯化?

重组蛋白分子量太大,110KD左右,镍柱纯化一直不成功,试了一系列咪唑梯度,每次都是杂蛋白跟着目的蛋白一起洗脱下来。甚至10mM咪唑都能把目的蛋白一下来,这跟镍柱的结合能力我也是醉了。80KD左右有一条杂蛋白就跟牛皮糖似的,跟目的蛋白如影随形。
我用的pet32a载体,有两个his标签。在不重新设计添加his标签的引物的情况下,该怎么获得纯化蛋白呢?急求,在线等!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanjun80

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-24 07:45:15
离子交换层析或者凝胶排阻层析,再或者大孔径超滤膜。
有数种方案可以搞定
我笃信:人定胜天!
2楼2016-11-24 05:35:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xudech

木虫 (正式写手)

xiaochong

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-24 07:45:34
和杂蛋白一起下来应该是His被包埋了 与大蛋白无关

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-11-24 07:05:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官abc

金虫 (正式写手)

王下七武海

引用回帖:
3楼: Originally posted by xudech at 2016-11-24 07:05:38
和杂蛋白一起下来应该是His被包埋了 与大蛋白无关

那该怎么办呢?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-11-24 08:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官abc

金虫 (正式写手)

王下七武海

引用回帖:
2楼: Originally posted by hanjun80 at 2016-11-24 05:35:01
离子交换层析或者凝胶排阻层析,再或者大孔径超滤膜。
有数种方案可以搞定

还在不?能具体说说嘛?可以的话能私下QQ吗?快毕业了,蛋白还没搞定,很着急
5楼2016-12-15 20:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官abc

金虫 (正式写手)

王下七武海

引用回帖:
3楼: Originally posted by xudech at 2016-11-24 07:05:38
和杂蛋白一起下来应该是His被包埋了 与大蛋白无关

还在不?能具体说说吗?很着急
6楼2016-12-15 20:32:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mataomatao

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

7楼2016-12-18 10:03:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yunyu818

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

8楼2016-12-19 12:06:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们可以提供蛋白纯化技术服务

发自小木虫Android客户端
9楼2016-12-19 12:18:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 上官abc 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:21 by mibUvS8DDCwf
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:12 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:33 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:21 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:09 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:33 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:01 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
请填处理意见