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使用UPLC建立分析方法时遇到的问题 已有3人参与
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我使用的是WATERS 的UPLC 柱子1.7um 长度5cm的柱子 现在正在分离花青素（一种带糖的黄酮类物质） 我在建立一个UPLC的分析方法 我的流动相A 是3%的甲酸水（0.1%的TFA） B 是15%的甲醇乙腈 我现在遇到的问题是无论是何种比例的流动相我都无法分开待测物质 文献报道 应该有13种组分在里面 图A 是纯B 相冲的 流速0.02mL/min 图B 这个是用95%的A 5%的B 等度冲的 流速0.02mL/min 现在我无论如何设置梯度 出峰总是在固定时间段 而我认为所有的峰都集中到一块了（图） 我现在想请教的问题 1.我的流动相的选择存在问题吗？是不是要把流动相A的酸度在调高一点，这些流动相是参考HPLC的方法 2.是不是梯度洗脱可以改变出峰时间，从而把峰都分开。 3.我要如何设计梯度，给不给说一下大概的想法 4.UPLC的流速正常在什么范围内，0.02mL/min 7min就出完峰，这个正常么？流速会不会太低。这个柱子是不是有问题。 5.HPLC的分析方法对UPLC方法的建立有参考价值吗？  IMG_20161121_164049.jpg  IMG_20161121_170023.jpg@wyy080214 |
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shi102241218
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4楼2016-11-22 11:48:23
shi102241218
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2楼2016-11-22 10:00:14
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大神啊 那我现在应该怎么办？ 请问我该如何更换流动相 更换完流动相我下来该做些什么 我现在实在建立uplc的分析方法 真参考的文献几乎是HPLC的 柱子是2.1*50mm 1.7um的 真心跪求你的回复啊 做了半个月了 一点进展也没 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-11-22 11:42:05
5楼2016-11-22 11:48:59