| 查看: 1719 | 回复: 2 | |||
[交流]
酶切连接失败，失败，然后失败了。。。 已有2人参与
|
| 跪求大神帮助啊，近期做酶切连接一直连接不上，前期是把我连T载的片段酶切与我的质粒双酶切后做连接，但由于我连接T载的片段大小与T载体大小太接近，相差400bp，酶切跑胶后虽然分开了，但切胶回收后做连接一直出现假阳性，PCR能P出我要的片段大小，但酶切验证发现均为原先连T载的东西（切胶不干净），由于我的质粒抗性与T载抗性相同，因此没办法再做验证了，几次加大胶的厚度，延长跑电泳的时间后仍然出现现有状况；后来改变计划，直接通过PCR获取我的目的片段，胶回收后酶切，再连接，但连接后板上不长菌。。。我用的酶是EcoRI，Nco I ;是我PCR产物酶切没有切开吗？orz... |
回复此楼» 猜你喜欢
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有258人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
2楼2017-06-11 17:20:07
3楼2018-03-14 14:43:32