| 查看: 1803 | 回复: 2 | |||
[交流]
酶切连接失败，失败，然后失败了。。。 已有2人参与
|
| 跪求大神帮助啊，近期做酶切连接一直连接不上，前期是把我连T载的片段酶切与我的质粒双酶切后做连接，但由于我连接T载的片段大小与T载体大小太接近，相差400bp，酶切跑胶后虽然分开了，但切胶回收后做连接一直出现假阳性，PCR能P出我要的片段大小，但酶切验证发现均为原先连T载的东西（切胶不干净），由于我的质粒抗性与T载抗性相同，因此没办法再做验证了，几次加大胶的厚度，延长跑电泳的时间后仍然出现现有状况；后来改变计划，直接通过PCR获取我的目的片段，胶回收后酶切，再连接，但连接后板上不长菌。。。我用的酶是EcoRI，Nco I ;是我PCR产物酶切没有切开吗？orz... |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有118人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
2楼2017-06-11 17:20:07
3楼2018-03-14 14:43:32
20