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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 原核表达问题
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yml11

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达问题 已有1人参与

各位大神，这是我做菌落PCR的图。做原核表达的，将100bp的片段连pET32a载体，酶切位点是Kpn1和Xho1！孔分别是Marker1000，菌p1，2，3，4（用我自己的引物），Marker2000，菌p5，6，7，8，9（用T7引物-但T7引物已放置一年左右了！）请问可以用吗？还是哪里出了问题呢？谢谢！

原核表达问题


@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2016-11-21 12:53:16
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Huobol

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

Kpn1酶切位点是在肠激酶酶切位点Enterokinase site之后，也就是说楼主把Enterokinase site序列给去掉了，这样做也是可以的吗？交流一下，
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让羽毛再飞一会儿
2楼2016-11-24 15:19:10
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yml11

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Huobol at 2016-11-24 15:19:10
Kpn1酶切位点是在肠激酶酶切位点Enterokinase site之后，也就是说楼主把Enterokinase site序列给去掉了，这样做也是可以的吗？交流一下，

这个我还没有考虑过，多谢提醒！实验室有做大片段2000bp左右的用这两个酶切位点的

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3楼2016-11-27 11:17:41
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