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yml11

新虫 (初入文坛)

[求助] 原核表达问题已有1人参与

各位大神,这是我做菌落PCR的图。做原核表达的,将100bp的片段连pET32a载体,酶切位点是Kpn1和Xho1!孔分别是Marker1000,菌p1,2,3,4(用我自己的引物),Marker2000,菌p5,6,7,8,9(用T7引物-但T7引物已放置一年左右了!)请问可以用吗?还是哪里出了问题呢?谢谢!

原核表达问题


@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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yml11

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Huobol at 2016-11-24 15:19:10
Kpn1酶切位点是在肠激酶酶切位点Enterokinase site之后,也就是说楼主把Enterokinase site序列给去掉了,这样做也是可以的吗?交流一下,

这个我还没有考虑过,多谢提醒!实验室有做大片段2000bp左右的用这两个酶切位点的

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3楼2016-11-27 11:17:41
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Huobol

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

Kpn1酶切位点是在肠激酶酶切位点Enterokinase site之后,也就是说楼主把Enterokinase site序列给去掉了,这样做也是可以的吗?交流一下,
让羽毛再飞一会儿
2楼2016-11-24 15:19:10
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