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丹之布丁

新虫 (小有名气)


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液相色谱柱的使用和维护问题
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一直很疑惑色谱柱的使用和维护问题,比如液相条件是80%甲醇-0.1%甲酸水,开机后需要先用100%甲醇冲柱子吗?还是说可以直接调调调到80%甲醇冲柱子平衡?另外,每天做完以后,冲柱子的程序应该是怎样的呢?先用10%甲醇-水冲15nim,然后中间40%甲醇,60%甲醇很快换到100%甲醇冲20nim,这样可以吗?

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祎祎祎祎祎超

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关机之前一定要用100%甲醇冲机子直至泵压小于200,开机时也需要用100%甲醇冲直至机子稳定后才能进样,不建议频繁换不同浓度的甲醇,因为实验流速不同,会造成机子不容易稳定,具体浓度得自己摸索着来,因为每种物质都不一样。

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12楼2016-11-17 21:54:47
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丹之布丁

新虫 (小有名气)


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12楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-17 21:54:47
关机之前一定要用100%甲醇冲机子直至泵压小于200,开机时也需要用100%甲醇冲直至机子稳定后才能进样,不建议频繁换不同浓度的甲醇,因为实验流速不同,会造成机子不容易稳定,具体浓度得自己摸索着来,因为每种物 ...

开机时是要先用100%甲醇冲至柱压稳了再换我的流动相比例平衡吗?我是想着头一天晚上柱子里充满了甲醇的,就直接用我的流动相比例平衡了…

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13楼2016-11-17 21:59:26
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祎祎祎祎祎超

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13楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 14:59:26
开机时是要先用100%甲醇冲至柱压稳了再换我的流动相比例平衡吗?我是想着头一天晚上柱子里充满了甲醇的,就直接用我的流动相比例平衡了…
...

开机时一定要先用100%甲醇冲一会(如果机子稳定的话,就五分钟,要是不稳定就得10分钟)之后,在换流动相(保证流动相里面没有气泡,用前超声,调PH.)

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14楼2016-11-17 22:01:37
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丹之布丁

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14楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-17 22:01:37
开机时一定要先用100%甲醇冲一会(如果机子稳定的话,就五分钟,要是不稳定就得10分钟)之后,在换流动相(保证流动相里面没有气泡,用前超声,调PH.)
...

对了,提到超声,我想问一下,你用乙腈为有机相的时候超声吗?我发现乙腈超声一直都有很多气泡出来

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15楼2016-11-17 22:09:34
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祎祎祎祎祎超

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15楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 15:09:34
对了,提到超声,我想问一下,你用乙腈为有机相的时候超声吗?我发现乙腈超声一直都有很多气泡出来
...

不管什么当做流动相,都得超声,不止是乙腈,因为要排气泡,防止柱子遇到气泡C18的柱子会坏掉的。任何溶液超声都会有气泡的~正常现象~因为超声波嘛~所以,不用担心拉~要平着拿,不要晃~还有就是一定得抽滤,抽滤完在超声,因为得除杂~希望能帮助到你~

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16楼2016-11-17 22:13:28
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丹之布丁

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16楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-17 22:13:28
不管什么当做流动相,都得超声,不止是乙腈,因为要排气泡,防止柱子遇到气泡C18的柱子会坏掉的。任何溶液超声都会有气泡的~正常现象~因为超声波嘛~所以,不用担心拉~要平着拿,不要晃~还有就是一定得抽滤,抽滤完 ...

按理来说超声是要脱气泡嘛,像甲酸水这些,刚开始超会有气泡冒出,两三分钟后就没气泡了。但是乙腈,超五分钟都仍然有很多气泡冒出?╭╮?

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17楼2016-11-17 22:19:10
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祎祎祎祎祎超

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17楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 15:19:10
按理来说超声是要脱气泡嘛,像甲酸水这些,刚开始超会有气泡冒出,两三分钟后就没气泡了。但是乙腈,超五分钟都仍然有很多气泡冒出?╭╮?
...

把瓶子盖拧送了超么?

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18楼2016-11-17 22:25:43
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丹之布丁

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18楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-17 22:25:43
把瓶子盖拧送了超么?
...

松了的

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19楼2016-11-17 22:27:51
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祎祎祎祎祎超

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19楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 15:27:51
松了的
...

乙腈超声前抽滤了么?

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20楼2016-11-17 22:33:51
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丹之布丁

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20楼: Originally posted by 祎祎祎祎祎超 at 2016-11-17 22:33:51
乙腈超声前抽滤了么?
...

没~我们做液质用的流动相都没抽滤

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21楼2016-11-17 22:47:20
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zhiyao0903

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色谱仪一般都配有脱气机吧,超声脱气效果不是很好。流动相没有缓冲盐,就照你的方法冲柱子都行

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22楼2016-11-17 22:48:20
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21楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 15:47:20
没~我们做液质用的流动相都没抽滤
...

我们用前都抽滤了……,乙腈貌似就是超声的时候会有气泡,但是尽可能不影响柱子,多超些时间

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23楼2016-11-17 22:50:36
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丹之布丁

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22楼: Originally posted by zhiyao0903 at 2016-11-17 22:48:20
色谱仪一般都配有脱气机吧,超声脱气效果不是很好。流动相没有缓冲盐,就照你的方法冲柱子都行

脱气机坏了是不是只要柱压是正常的就没问题

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24楼2016-11-17 22:57:59
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zhiyao0903

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24楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 22:57:59
脱气机坏了是不是只要柱压是正常的就没问题
...

如楼上所说,流动相使用前抽滤,一是可以脱气,二是可以除去颗粒物质以免堵塞色谱柱。一般压力比较平稳的话就比较正常,实验过程中多注意下管路是否有微小气泡聚集。尽量不要使气泡进入色谱柱,以免影响实验结果

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25楼2016-11-17 23:06:14
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25楼: Originally posted by zhiyao0903 at 2016-11-17 23:06:14
如楼上所说,流动相使用前抽滤,一是可以脱气,二是可以除去颗粒物质以免堵塞色谱柱。一般压力比较平稳的话就比较正常,实验过程中多注意下管路是否有微小气泡聚集。尽量不要使气泡进入色谱柱,以免影响实验结果
...

如果色谱柱进了气泡对结果的影响是怎样的呢?具体表观是什么呢?

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26楼2016-11-17 23:55:18
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zhiyao0903

铁虫 (小有名气)



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26楼: Originally posted by 丹之布丁 at 2016-11-17 23:55:18
如果色谱柱进了气泡对结果的影响是怎样的呢?具体表观是什么呢?
...

造成压力,基线波动,出现尖锐杂峰

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27楼2016-11-18 07:49:11
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2016-11-17 21:48   回复  
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2016-11-17 21:48   回复  
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skdwdm4楼
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wdan05217楼
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jixiangbao10楼
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