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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 求助Lowry法测定蛋白质
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Cpt.Algren

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助Lowry法测定蛋白质 已有2人参与

正在进行测定蚕蛹蛋白质含量实验。请教各位怎样把干蚕蛹中的蛋白质全部溶解在溶剂(蒸馏水)中。

之前实验按照文献，取了0.1g干蚕蛹，放入离心管中，加入10mL蒸馏水，1滴0.1M NaOH，捣碎，90℃水浴30min。然后再取0.1mL溶液按照Lowry法测定蛋白含量。这样处理样本能否让所有蛋白溶解？水浴后是否需要过滤再测定？不过滤会对实验结果有影响？请教各位大神实验应该怎样改进。感谢各位帮助！

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1楼 2016-11-16 21:55:02
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Cpt.Algren

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2016-11-17 00:02:43
如果想测总蛋白，只能用凯氏定氮法，lowery、考马斯亮蓝等方法只能测可溶性蛋白的含量

请问如何让所有蛋白充分溶解在水中？有什么pH的要求吗？

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4楼2016-11-17 22:15:28
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
Cpt.Algren(sytucom代发): 金币+5, 感谢应助，请继续关注楼主回复 2016-11-17 22:34:52
如果想测总蛋白，只能用凯氏定氮法，lowery、考马斯亮蓝等方法只能测可溶性蛋白的含量

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2楼2016-11-17 00:02:43
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yaoxc

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Cpt.Algren(sytucom代发): 金币+5, 感谢应助，请继续关注楼主回复 2016-11-17 22:35:04
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2016-11-17 00:02:43
如果想测总蛋白，只能用凯氏定氮法，lowery、考马斯亮蓝等方法只能测可溶性蛋白的含量

确实是这样的。
凯氏定氮法是唯一准确而应用广泛的方法，其他方法都不行。
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3楼2016-11-17 08:12:08
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by Cpt.Algren at 2016-11-17 22:15:28
请问如何让所有蛋白充分溶解在水中？有什么pH的要求吗？
...

不是所有的蛋白都是可溶的，有些蛋白就是不能溶解。调节pH也不能确保所有蛋白都溶解。

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5楼2016-11-17 23:45:26
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