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lishuaiguang新虫 (初入文坛)
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[求助]
PCR扩增基因组DNA其中606 bp序列一直失败 已有3人参与
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用基因组提取试剂盒提取了细胞的基因组DNA,电泳检测大于15000 bp处有单一亮条带,想扩增基因组其中一段序列,根据Genbank上的基因组序列设计了一套引物,上游引物跨内含子和外显子,下游引物在内含子中,产物大小为606 bp,扩了两次,换了两种高保真酶,都没有扩出来,电泳检测什么条带都没有。有没有大神给出建议,谢谢了! @wizardfan 发自小木虫Android客户端 |
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lishuaiguang
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我也是用的Primer Prime 5设计的,后来在上游和下游又设计了几对,其中一对能扩增出来,真的是引物的问题。但是为什么其他几对扩增不出来,我至今不明白,位置相差也不是很远就一二百bp,能不能帮忙解释下我今天求助的那个问题 发自小木虫Android客户端 |
15楼2017-08-08 18:15:09
lishuaiguang
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2楼2016-11-16 10:28:21
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3楼2016-11-16 22:12:04
star013
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