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Taily台莉

新虫 (初入文坛)

[求助] 已知基因序列,如何扩增基因全长 已有3人参与

我的手上现在有一段现成的核苷酸序列(在质粒里),但是该序列离全长序列还差几个核苷酸(开头有10个左右的核苷酸是一样的,中间差25个左右核苷酸,之后的500个左右的核苷酸是一样的),我也有全长的核苷酸序列信息,想问问大家怎么利用我的序列扩增全长序列?我师兄给的方案是设计两对引物扩增全长序列的两段,再连起来(如下图所示)。但是他也说了由于第一段序列太短了,所以不太可能成功。有其他大神知道该怎么做吗?求解答,很紧急

已知基因序列,如何扩增基因全长


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幸福就是吃饱了撑着
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天下阳光

新虫 (初入文坛)

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感谢参与,应助指数 +1
单引物一端开始扩增可以试试
2楼2016-11-08 21:46:48
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longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果知道全长序列的信息,看看是什么物种里面的,提前RNA反转扩增就可以啊。
3楼2016-11-09 08:10:19
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田生帅菜

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
so easy 你的上游引物设计的长一点儿就可以了,包括你有的和没有的,我觉得70bp就够了吧,下游引物正常,一次就从质粒上扩下来了

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4楼2016-11-09 08:26:09
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