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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 同源重组
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新人求帮助

新虫 (初入文坛)

[求助] 同源重组 已有2人参与

最近想用同源重组的方法做个构建，但是是第一次做，想问下关于引物的设计方法和载体线性化酶切位点的选择

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1楼 2016-11-06 16:35:13
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田生帅菜

新虫 (正式写手)

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★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-06 21:23:59
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1楼: Originally posted by 新人求帮助 at 2016-11-06 16:35:13
最近想用同源重组的方法做个构建，但是是第一次做，想问下关于引物的设计方法和载体线性化酶切位点的选择

你的这个问题非常简单。你去试剂公司的网站下载个说明书，写的特别清楚明了。我用的是vazyme的，挺好用。

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3楼2016-11-06 20:38:12
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生态学新秀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-06 21:23:47
xn8008: 应助指数+1 2016-11-06 21:23:52
下载相关文献，应该有引物设计的方法

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2楼2016-11-06 17:21:08
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新人求帮助

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-06 20:38:12
你的这个问题非常简单。你去试剂公司的网站下载个说明书，写的特别清楚明了。我用的是vazyme的，挺好用。
...

看了说明书，但是酶切位点具体选在哪一区域呢？说明书上只是写选择gc含量在40%-60%的区域

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4楼2016-11-07 14:40:43
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田生帅菜

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 新人求帮助 at 2016-11-07 14:40:43
看了说明书，但是酶切位点具体选在哪一区域呢？说明书上只是写选择gc含量在40%-60%的区域
...

在多克隆位点区域啊，选择两个离得远点儿的就行

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5楼2016-11-07 14:42:15
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