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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因载体
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然然家的

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因载体 已有2人参与

基因与载体连接转化后涂平板，然后挑菌pcr，跑核酸胶一直没有条带，没有连接成功哪里出错啦，求解！！！
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1楼 2016-10-28 21:02:19
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-29 11:30:17
是不是菌太浓了？我也遇到过菌液PCR没有条带，但是提质粒、酶切鉴定，是对的这种情况。
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2楼2016-10-28 22:36:48
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然然家的

新虫 (初入文坛)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-29 11:30:23
我是挑的菌，用10微升混匀，然后用1微升PCR的，不太可能是菌浓度大吧。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2016-10-29 08:23:32
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010308Jing

木虫 (正式写手)
会不会就是假阳性克隆啊？载体本身就没有连上呢

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4楼2016-10-29 15:08:51
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lemonvivi

新虫 (小有名气)
你那个被污染了

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5楼2016-10-31 08:39:51
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pcr,酶切，转化，都有可能出问题

发自小木虫Android客户端
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···
6楼2016-10-31 08:42:55
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然然家的

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-10-29 15:08:51
会不会就是假阳性克隆啊？载体本身就没有连上呢

我用剩下的菌液摇床，然后提质粒，pcr，跑胶，有微弱的条带，是不是连接率比较低呀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2016-10-31 09:34:49
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qhiv6

新虫 (小有名气)
试一下酶切，提质粒尽量浓度大一些然后酶切跑电泳

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8楼2016-11-02 13:54:47
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