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吴美儒

新虫 (小有名气)


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质粒提取
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我用碱法抽提质粒,最后得到的图是这样,到底算提出来了没有?

质粒提取


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lixg

铁杆木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳上样量再小一些,条带可以分得很开,就更好了
19楼2016-10-29 10:34:13
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提取出来了,你跑电泳加样太多,太亮了。在marker100bp以下还有条带,说明你裂解过度了,有基因组碎片,你可以控制把握好碱用量及碱裂解时间,这样你的质粒提取质量会更好。

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23楼2016-10-29 22:29:36
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Gorstin

新虫 (初入文坛)


18楼2016-10-28 23:21:04
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010308Jing

木虫 (正式写手)


提出来了,跑胶的样太多了

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20楼2016-10-29 15:03:39
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二大哥

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提出来了,我想问一下,纯化后的DNA还是有杂带是什么原因呢

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21楼2016-10-29 15:49:34
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点点滴star

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提出来了,有些拖尾了,是不是没纯化好呢,还需要优化一下条件

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22楼2016-10-29 16:09:48
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qq1987nana

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那是RNA.加RNA酶

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24楼2016-10-30 08:12:12
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吴美儒

新虫 (小有名气)


引用回帖:
19楼: Originally posted by lixg at 2016-10-29 10:34:13
电泳上样量再小一些,条带可以分得很开,就更好了

好的,我我稀释20倍之后跑电泳为啥本来有3条带的样品,只跑出来了一条带!

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25楼2016-10-30 13:16:27
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吴美儒

新虫 (小有名气)


送红花一朵
引用回帖:
23楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-10-29 22:29:36
提取出来了,你跑电泳加样太多,太亮了。在marker100bp以下还有条带,说明你裂解过度了,有基因组碎片,你可以控制把握好碱用量及碱裂解时间,这样你的质粒提取质量会更好。
...

裂解时间为冰浴5min

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26楼2016-10-30 13:19:11
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
26楼: Originally posted by 吴美儒 at 2016-10-30 13:19:11
裂解时间为冰浴5min
...

因为我平常是用试剂盒提取,所以效果要好好多,一般我加完碱(P2)在室温下缓慢摇匀,这一步一般1-2min完成,然后就加酸了

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27楼2016-10-31 07:32:03
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吴美儒

新虫 (小有名气)


引用回帖:
27楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-10-31 07:32:03
因为我平常是用试剂盒提取,所以效果要好好多,一般我加完碱(P2)在室温下缓慢摇匀,这一步一般1-2min完成,然后就加酸了
...

好的,谢谢啦!

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28楼2016-10-31 11:21:47
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gltang2013

铜虫 (小有名气)


30楼2016-10-31 12:27:19
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吴美儒

新虫 (小有名气)


引用回帖:
23楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-10-29 22:29:36
提取出来了,你跑电泳加样太多,太亮了。在marker100bp以下还有条带,说明你裂解过度了,有基因组碎片,你可以控制把握好碱用量及碱裂解时间,这样你的质粒提取质量会更好。
...

我想问一下抽提质粒的溶液3的ph值一定要是4.8吗?4.75可不可以了?

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31楼2016-11-02 20:23:25
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hanx12132楼
2016-10-26 20:00   回复  
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想lxiang4楼
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Tomato_5楼
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lwk2057楼
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郭国长8楼
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legong10楼
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dfswzn11楼
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qwert159212楼
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雨风之13楼
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木虫m号15楼
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woxinggde16楼
2016-10-26 20:01   回复  
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78105570729楼
2016-10-31 12:21   回复  
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