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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒提取
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吴美儒

新虫 (小有名气)
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质粒提取
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我用碱法抽提质粒，最后得到的图是这样，到底算提出来了没有？

质粒提取


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1楼 2016-10-26 20:00:11
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电泳上样量再小一些，条带可以分得很开，就更好了
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19楼2016-10-29 10:34:13
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提取出来了，你跑电泳加样太多，太亮了。在marker100bp以下还有条带，说明你裂解过度了，有基因组碎片，你可以控制把握好碱用量及碱裂解时间，这样你的质粒提取质量会更好。

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吴美儒
23楼2016-10-29 22:29:36
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Gorstin

新虫 (初入文坛)
出来了啊，挺好的

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18楼2016-10-28 23:21:04
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010308Jing

木虫 (正式写手)
提出来了，跑胶的样太多了

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20楼2016-10-29 15:03:39
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二大哥

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提出来了，我想问一下，纯化后的DNA还是有杂带是什么原因呢

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21楼2016-10-29 15:49:34
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点点滴star

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提出来了，有些拖尾了，是不是没纯化好呢，还需要优化一下条件

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22楼2016-10-29 16:09:48
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qq1987nana

新虫 (小有名气)
★
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那是RNA.加RNA酶

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24楼2016-10-30 08:12:12
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吴美儒

新虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by lixg at 2016-10-29 10:34:13
电泳上样量再小一些，条带可以分得很开，就更好了

好的，我我稀释20倍之后跑电泳为啥本来有3条带的样品，只跑出来了一条带！

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25楼2016-10-30 13:16:27
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吴美儒

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
23楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-10-29 22:29:36
提取出来了，你跑电泳加样太多，太亮了。在marker100bp以下还有条带，说明你裂解过度了，有基因组碎片，你可以控制把握好碱用量及碱裂解时间，这样你的质粒提取质量会更好。
...

裂解时间为冰浴5min

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26楼2016-10-30 13:19:11
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
26楼: Originally posted by 吴美儒 at 2016-10-30 13:19:11
裂解时间为冰浴5min
...

因为我平常是用试剂盒提取，所以效果要好好多，一般我加完碱（P2）在室温下缓慢摇匀，这一步一般1-2min完成，然后就加酸了

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27楼2016-10-31 07:32:03
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吴美儒

新虫 (小有名气)
引用回帖:
27楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-10-31 07:32:03
因为我平常是用试剂盒提取，所以效果要好好多，一般我加完碱（P2）在室温下缓慢摇匀，这一步一般1-2min完成，然后就加酸了
...

好的，谢谢啦！

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28楼2016-10-31 11:21:47
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gltang2013

铜虫 (小有名气)
正确阳性。

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30楼2016-10-31 12:27:19
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吴美儒

新虫 (小有名气)
引用回帖:
23楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-10-29 22:29:36
提取出来了，你跑电泳加样太多，太亮了。在marker100bp以下还有条带，说明你裂解过度了，有基因组碎片，你可以控制把握好碱用量及碱裂解时间，这样你的质粒提取质量会更好。
...

我想问一下抽提质粒的溶液3的ph值一定要是4.8吗？4.75可不可以了？

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31楼2016-11-02 20:23:25
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hanx12132楼
2016-10-26 20:00   回复  
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梦坠落kk3楼
2016-10-26 20:00   回复  
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想lxiang4楼
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Tomato_5楼
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熊博士_20156楼
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lwk2057楼
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郭国长8楼
2016-10-26 20:00   回复  
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lurenluguo9楼
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legong10楼
2016-10-26 20:00   回复  
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dfswzn11楼
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qwert159212楼
2016-10-26 20:00   回复  
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雨风之13楼
2016-10-26 20:00   回复  
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喂喂喂魏14楼
2016-10-26 20:00   回复  
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木虫m号15楼
2016-10-26 20:01   回复  
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woxinggde16楼
2016-10-26 20:01   回复  
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过烟云烟17楼
2016-10-26 20:01   回复  
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78105570729楼
2016-10-31 12:21   回复  
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