| 查看: 696 | 回复: 2 | ||
[求助]
转化后摇菌提质粒酶切没结果 已有1人参与
|
|
从转化后的平板上挑单菌落摇菌，做菌液PCR结果是对的，然而接种过夜摇了以后提质粒后酶切就切不来了是什么原因呀？大神们，救救我，又死在这一步了，呜呜呜呜……………… 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有96人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
winyuyuyu123
金虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 813.3
- 红花: 2
- 帖子: 68
- 在线: 25.3小时
- 虫号: 4912791
- 注册: 2016-08-12
- 专业: 病原真菌学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
首先，确定你的单菌落是阳性，既然做了菌液PCR，大小确定是对的，不妨顺便做个测序，建议用通用引物测序，确定目标片段两侧的酶切位点的准确性。 如果确定了序列和酶切位点准确了，那就可能是酶切的问题了，双酶切的话效率会有所降低，选用合适的buffer，适当延长酶切时间，可以37℃切过夜试试。 还是不行的话，怀疑内切酶变质失活，换个批次或换个品牌再试试。 |
Gengli09092楼2016-10-24 08:31:01
3楼2016-10-24 12:11:39
10