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还在fighting

新虫 (初入文坛)

[求助] NCBI上的序列下载建树对序列的选择要求。 已有2人参与

我是要做一个目里面几十个种的进化树,然后我选取16S的序列,但是序列长短差距较大一些1500多,一些500多(没法选择长度基本一致的,因为有些只有这么一个),然后我该怎么去建树呢?我自己跑了一下来看,建出来的树看着完全不对。一个科的都不能聚在一起。是不是序列选取有问题呢?还是应该怎么做?

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secretov

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5楼: Originally posted by 还在fighting at 2016-10-22 17:02:00
序列是全的,但是酶切位点不一样,长度就不一样了。
...

您用的是16s基因的片段是么,由不同酶切位点切出来的片段么。 我看到文献里,用16s基因建树的时候虽然可以用片段,似乎是用同一引物扩增出来,也就是同一段的片段(这种形容可能不准确)且片段大小也是差不多的。 要不多序列对比后,人为的去掉两边不是匹配的序列,再建树看看呢。或者用PAUP建一下ML树和MP树(ML树要选模型)
6楼2016-10-22 23:02:54
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secretov

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【答案】应助回帖

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-10-24 22:36:37
用核苷酸序列还是蛋白质序列建树的呢,用的什么软件呢,MEGA么,其实可以用PAUP4来试一下,而且算之前最好用mrbayes-3.1.2 算一下选择什么模型。而且还要看你选择用什么算法,一般是用邻接法(Neighbor-Joining,NJ)、最大似然法(Maximum likelihood,ML)和最大简约法(Maximum parsimony,MP),我老师教我的时候是说用这三种算法分别建树,看是不是结果相似,相似就是对的。另外选择一个合适外群也挺重要的。我也才在学习这方面的,欢迎讨论。
2楼2016-10-22 15:52:38
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secretov

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长短不一是什么意思呢,我觉得只要序列是全的就可以,不全应该不行
3楼2016-10-22 15:56:26
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还在fighting

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by secretov at 2016-10-22 15:52:38
用核苷酸序列还是蛋白质序列建树的呢,用的什么软件呢,MEGA么,其实可以用PAUP4来试一下,而且算之前最好用mrbayes-3.1.2 算一下选择什么模型。而且还要看你选择用什么算法,一般是用邻接法(Neighbor-Joining,NJ ...

我是用Mrbayes建树,外群选择的是一个纲里面的另外一个目,并且用mega的ML建树进行比对,我现在的问题就是在NCBI上选择的序列别人用的酶切位点不一样,做出来的序列长度不一样,这样建树就有问题。不知道该怎么解决,

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4楼2016-10-22 17:01:26
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还在fighting

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by secretov at 2016-10-22 15:56:26
长短不一是什么意思呢,我觉得只要序列是全的就可以,不全应该不行

序列是全的,但是酶切位点不一样,长度就不一样了。

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5楼2016-10-22 17:02:00
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还在fighting

新虫 (初入文坛)

嗯嗯,我用Mrbayes正在跑数据。没有找到paup安装包,发我一份503842552QQ.com

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7楼2016-10-24 20:19:10
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新虫 (初入文坛)

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6楼: Originally posted by secretov at 2016-10-22 23:02:54
您用的是16s基因的片段是么,由不同酶切位点切出来的片段么。 我看到文献里,用16s基因建树的时候虽然可以用片段,似乎是用同一引物扩增出来,也就是同一段的片段(这种形容可能不准确)且片段大小也是差不多的。  ...

嗯嗯,我用Mrbayes正在跑数据。没有找到paup安装包,发我一份哇503842552QQ.com

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8楼2016-10-24 20:21:04
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secretov

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8楼: Originally posted by 还在fighting at 2016-10-24 20:21:04
嗯嗯,我用Mrbayes正在跑数据。没有找到paup安装包,发我一份哇503842552QQ.com
...

可以

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9楼2016-10-24 20:21:51
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secretov

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引用回帖:
6楼: Originally posted by secretov at 2016-10-22 23:02:54
您用的是16s基因的片段是么,由不同酶切位点切出来的片段么。 我看到文献里,用16s基因建树的时候虽然可以用片段,似乎是用同一引物扩增出来,也就是同一段的片段(这种形容可能不准确)且片段大小也是差不多的。  ...

不好意思 今天有点事 明天发你邮箱

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10楼2016-10-25 00:51:18
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