应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 病原/病毒 » 利用qPCR检测野生型病毒和突变病毒的感染效率
71/1返回列表
查看: 1300  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

落叶知秋1

新虫 (初入文坛)

[交流] 利用qPCR检测野生型病毒和突变病毒的感染效率 已有1人参与

我现在有SFV及其突变型的两种病毒。我想看这两个病毒感染细胞的区别，但是不知道病毒滴度，我可以用SFV病毒的某一个质粒作为模板然后做一个qPCR，然后将质粒模板浓度与Ct值做一个标准曲线。得到标准曲线后，用两个病毒感染细胞后提取病毒RNA并做qRT-PCR，并利用Ct值将两个病毒的量调整在一个数量级。请问各位大神这样做行得通吗？急急急
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-10-18 15:59:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有几个问题。1.你的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-20 05:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1.你的原始毒株和变异株是不是用同一对引物？2.如果是同一对引物的话怎么区别是否突变。3.可以通过分光光度计来测定质粒的量之后稀释出四条或者更多的标准曲线。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-10-20 05:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落叶知秋1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 许彦 at 2016-10-20 05:15:42
1.你的原始毒株和变异株是不是用同一对引物？2.如果是同一对引物的话怎么区别是否突变。3.可以通过分光光度计来测定质粒的量之后稀释出四条或者更多的标准曲线。

是用得同一对引物。我已经有突变的病毒。我想先提取两种病毒的RNA，然后qRT-PCR，得出对应的Ct值，在将Ct值与变准曲线比较。最后将两个病毒的Ct值调到相等。这样理论认为两个病毒的量是相等的。PS:我想用相等量的病毒去感染细胞，然后看两个病毒的感染效果。但是不知道这样可不可以
赞一下 回复此楼
4楼2016-10-20 15:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 落叶知秋1 at 2016-10-20 15:43:24
是用得同一对引物。我已经有突变的病毒。我想先提取两种病毒的RNA，然后qRT-PCR，得出对应的Ct值，在将Ct值与变准曲线比较。最后将两个病毒的Ct值调到相等。这样理论认为两个病毒的量是相等的。PS:我想用相等量的病 ...

我有一个建议。你按照你的设计的引物合成质粒，然后用质粒定标准曲线。就不用你去来回算了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-20 19:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落叶知秋1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 许彦 at 2016-10-20 19:10:23
我有一个建议。你按照你的设计的引物合成质粒，然后用质粒定标准曲线。就不用你去来回算了。
...

我就是用质粒为模板做得qPCR，然后以Ct值为纵坐标，质粒拷贝数为横坐标做得标准曲线。
赞一下 回复此楼
6楼2016-10-21 08:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 落叶知秋1 at 2016-10-21 08:19:29
我就是用质粒为模板做得qPCR，然后以Ct值为纵坐标，质粒拷贝数为横坐标做得标准曲线。...

看懂你的意思了，我觉得没问题的，但是qpcr敏感性太强，

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-10-21 14:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落叶知秋1 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +5 瞬息宇宙 2026-09-01 11/550 2026-09-02 14:15 by simwe390
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭