应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 病原/病毒 » 利用qPCR检测野生型病毒和突变病毒的感染效率
71/1返回列表
查看: 1289  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

落叶知秋1

新虫 (初入文坛)

[交流] 利用qPCR检测野生型病毒和突变病毒的感染效率 已有1人参与

我现在有SFV及其突变型的两种病毒。我想看这两个病毒感染细胞的区别，但是不知道病毒滴度，我可以用SFV病毒的某一个质粒作为模板然后做一个qPCR，然后将质粒模板浓度与Ct值做一个标准曲线。得到标准曲线后，用两个病毒感染细胞后提取病毒RNA并做qRT-PCR，并利用Ct值将两个病毒的量调整在一个数量级。请问各位大神这样做行得通吗？急急急
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-10-18 15:59:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有几个问题。1.你的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-20 05:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1.你的原始毒株和变异株是不是用同一对引物？2.如果是同一对引物的话怎么区别是否突变。3.可以通过分光光度计来测定质粒的量之后稀释出四条或者更多的标准曲线。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-10-20 05:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落叶知秋1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 许彦 at 2016-10-20 05:15:42
1.你的原始毒株和变异株是不是用同一对引物？2.如果是同一对引物的话怎么区别是否突变。3.可以通过分光光度计来测定质粒的量之后稀释出四条或者更多的标准曲线。

是用得同一对引物。我已经有突变的病毒。我想先提取两种病毒的RNA，然后qRT-PCR，得出对应的Ct值，在将Ct值与变准曲线比较。最后将两个病毒的Ct值调到相等。这样理论认为两个病毒的量是相等的。PS:我想用相等量的病毒去感染细胞，然后看两个病毒的感染效果。但是不知道这样可不可以
赞一下 回复此楼
4楼2016-10-20 15:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 落叶知秋1 at 2016-10-20 15:43:24
是用得同一对引物。我已经有突变的病毒。我想先提取两种病毒的RNA，然后qRT-PCR，得出对应的Ct值，在将Ct值与变准曲线比较。最后将两个病毒的Ct值调到相等。这样理论认为两个病毒的量是相等的。PS:我想用相等量的病 ...

我有一个建议。你按照你的设计的引物合成质粒，然后用质粒定标准曲线。就不用你去来回算了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-20 19:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落叶知秋1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 许彦 at 2016-10-20 19:10:23
我有一个建议。你按照你的设计的引物合成质粒，然后用质粒定标准曲线。就不用你去来回算了。
...

我就是用质粒为模板做得qPCR，然后以Ct值为纵坐标，质粒拷贝数为横坐标做得标准曲线。
赞一下 回复此楼
6楼2016-10-21 08:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 落叶知秋1 at 2016-10-21 08:19:29
我就是用质粒为模板做得qPCR，然后以Ct值为纵坐标，质粒拷贝数为横坐标做得标准曲线。...

看懂你的意思了，我觉得没问题的，但是qpcr敏感性太强，

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-10-21 14:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落叶知秋1 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +11 Lanmanbaby 2026-08-09 19/950 2026-08-10 11:28 by zhangzhanzz
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +5 瞬息宇宙 2026-08-10 6/300 2026-08-10 10:38 by Tide man
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +7 yufeiwaner 2026-08-09 7/350 2026-08-10 09:08 by zju2000
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭