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毕赤酵母破壁 已有2人参与
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我用毕赤酵母CS115做表达（外源基因表达），但是每次破壁都破不了。用的是玻璃株破碎法。具体步骤：先收集细胞，用去离子水洗2两次，加入100ul的PBSbuffer，再加入等体积的玻璃株漩涡（涡旋30s，冰上放置30s，反复8次）离心收集上清，电泳。 除此之外，还用了试剂盒提取，和0.3M的氢氧化钠裂解，都没有破壁。 在配置BMMY和BMGY培养基时，里面需要磷酸钾。我先配的时候溶液是清澈的，但是灭菌后就是浑浊的。会不会有这个关系。然后，先在BMGY培养时，菌会有氨气的味道，很刺鼻。有没有谁可以解答我疑问啊？求大神指点！！！！！  |
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