应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒去磷酸化，乙醇沉淀问题
101/1返回列表
查看: 1655  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zeyuanzi

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒去磷酸化，乙醇沉淀问题 已有1人参与

今天做了质粒PET30a的去磷酸化，乙醇沉淀，电泳时什么都没有。之前提的质粒图一，包括回收图二质量都不错，不知为什么酶切后乙醇沉淀就什么都没有了。
是不是乙醇沉淀时把质粒倒掉了？那怎么回收沉淀？除了这个原因还有可能是其他问题吗。
求大神！

质粒去磷酸化，乙醇沉淀问题


质粒去磷酸化，乙醇沉淀问题-1


@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-10-04 14:58:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
有人帮忙解答吗，木虫的大神很多，我怎么遇不到

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-04 17:27:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫
帮忙顶一下！
回复此楼
3楼2016-10-04 19:04:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
有大神吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2016-10-04 20:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
3mol乙酸钠+无水乙醇

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-04 20:42:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeyuanzi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 梦想天行 at 2016-10-04 20:42:01
3mol乙酸钠+无水乙醇

这些步骤我都有照来

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-10-05 08:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by zeyuanzi at 2016-10-05 08:56:52
这些步骤我都有照来
...

换试剂盒或者加入商品化核酸沉淀剂！

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2016-10-05 08:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

弑者星魂

金虫 (正式写手)
酶切之后为什么要乙醇沉淀。我假设你的目的是酶切之后载体去磷酸化

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-10-05 21:58:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)
酶切之后可以直接点个胶看一下。磷酸后也可以直接点胶看。我觉得很可能是酶切后磷酸化时间太长了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-10-05 22:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草溪河

铁虫 (著名写手)
考虑回收效率吧。是先平末端酶切质粒，电泳回收，再去磷酸化乙醇沉淀吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2016-10-06 07:44:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zeyuanzi 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭