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蛋白表达求助 已有1人参与
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我一直在做真核酵母表达但是蛋白跑胶的时候没有目的蛋白条带，我做激酶蛋白的表达，用的载体是PPICZB,酵母是毕赤酵母，醇氧化酶基因Aox1启动子启动外源基因的表达，诱导表达的诱导物是甲醇，诱导温度是28℃，诱导时间48-72小时，但是已经做了7-8次了没有任何的目的蛋白表达出来。我的师兄（已经毕业）曾经表达出来过一次，因为赶上了春节回家过了一个年，回来后再也表达不出来了。有一次我做预实验好像表达出来一次，但是当大量表达的时候又没有了。这次的菌种是从-80℃拿出来的，当时师兄表达出来的也是从-80℃拿出来的，不知道低温储藏菌种和蛋白表达出来之间有没有必然的联系，可惜原始菌种的最后一点被我做预实验用掉了，当时也没意识到这个问题就没有保存菌种，很后悔啊！求大神指导一下吧！ @gyesang @hc-material 发自小木虫Android客户端 |
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