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小李纸11银虫 (正式写手)
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毕赤酵母表达
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| 重组质粒转化毕赤酵母之前进行线性化，酶切后的产物需要纯化吗？转化前还需要对酶切产物进行特殊处理吗？如果纯化的话，洗脱液会不会对转化有影响？ |
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-09-29 14:59:54
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单酶切后要纯化，洗脱用双蒸水，转化前调整好总体积，确保plasmid质量足够，其实很好转，但实验周期太长 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
小李纸112楼2016-09-29 14:14:10
小李纸11
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3楼2016-09-29 16:54:38
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如果你是用biorad的电转染仪器的话，里面是有预设毕赤的程序的，我一开始是用最老式的eppendorf电转仪，里面就只能调电压，一般调2000-2200v吧，停留时间是因你做的感受态好坏而定的，毕赤酵母推荐在5毫秒左右，转完之后我是直接涂Ypds平板筛选抗性基因，这当然有点运气成分，毕竟酵母的假阳性比较高，不过电转做得好没问题，至于Mm，md应该是筛选甲醇敏感型之类的吧，反正我没用过 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-09-29 23:21:18
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5楼2016-10-03 10:11:56
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