| 查看: 811 | 回复: 4 | ||
小李纸11银虫 (正式写手)
|
[求助]
毕赤酵母表达
|
| 重组质粒转化毕赤酵母之前进行线性化，酶切后的产物需要纯化吗？转化前还需要对酶切产物进行特殊处理吗？如果纯化的话，洗脱液会不会对转化有影响？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有285人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-09-29 14:59:54
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-09-29 14:59:54
|
单酶切后要纯化，洗脱用双蒸水，转化前调整好总体积，确保plasmid质量足够，其实很好转，但实验周期太长 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
小李纸112楼2016-09-29 14:14:10
小李纸11
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1796.5
- 散金: 322
- 红花: 7
- 帖子: 383
- 在线: 34.1小时
- 虫号: 4177857
- 注册: 2015-10-27
- 性别: MM
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
3楼2016-09-29 16:54:38
|
如果你是用biorad的电转染仪器的话，里面是有预设毕赤的程序的，我一开始是用最老式的eppendorf电转仪，里面就只能调电压，一般调2000-2200v吧，停留时间是因你做的感受态好坏而定的，毕赤酵母推荐在5毫秒左右，转完之后我是直接涂Ypds平板筛选抗性基因，这当然有点运气成分，毕竟酵母的假阳性比较高，不过电转做得好没问题，至于Mm，md应该是筛选甲醇敏感型之类的吧，反正我没用过 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-09-29 23:21:18
小李纸11
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1796.5
- 散金: 322
- 红花: 7
- 帖子: 383
- 在线: 34.1小时
- 虫号: 4177857
- 注册: 2015-10-27
- 性别: MM
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
5楼2016-10-03 10:11:56
10