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涉水fish

新虫 (初入文坛)

[交流] 卵巢RNA提取问题,电泳有拖尾 已有1人参与

如题,取鲫鱼卵巢组织块用液氮速冻,每管加1mlTrizol,电动匀浆机匀浆2-3次,promega的SV Total RNA Isolation System试剂盒,用DNase Ⅰ室温(27度)处理30min,可是RNA质量一直不好,5s很亮,28s和18s亮度分不出明显差异,并且最主要的是,一直有拖尾(如图)。尝试过减少组织样、匀浆更充分(多加珠子)、37度消化处理,均无法消除拖尾现象,且OD260/280在2.1~2.2之间,OD260/230在2.2左右。

因为要用卵巢RNA构建cDNA库,对RNA质量要求很高,不知道大家有没有什么好的建议和方法,感激不尽!
图2中拖尾的为卵巢,其他的为同批次提取的其他组织

卵巢RNA提取问题,电泳有拖尾
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卵巢RNA提取问题,电泳有拖尾-1
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新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,请问您最后怎么解决的呢?晚辈初提提RNA,提了几次卵巢也是5s特别亮

发自小木虫Android客户端
2楼2019-07-17 15:30:29
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