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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA 降解
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天晴了！

新虫 (小有名气)

[求助] DNA 降解 已有1人参与

怀疑DNA 降解，PCR 扩增产物没有条带，用CTAB 法提取的DNA, 引物是新稀释的，退火温度60，PCR 体系15ul, 模板1ul, 引物1ul 。同一引物每两孔一个样，个别不是。1%的琼脂糖电泳，但这次的模板是新提的，是不是又降解了？原因是什么呢？怎样避免呢？请各位广大的虫友们帮帮忙吧！

DNA 降解


@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-09-25 09:53:31
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kuaile5420: 金币+2, 欢迎发帖交流 2016-09-25 16:33:31
1、检查是不是CTAB不好用，2、同样的样品换引物扩增试试，3、调节退火温度和扩增时间，或者调换酶

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不是优秀，而是不可替代
2楼2016-09-25 10:49:09
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天晴了！

新虫 (小有名气)
最终浓度50ng /ul

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9楼2016-12-05 20:50:53
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普通回帖

天晴了！

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by didongwei at 2016-09-25 10:49:09
1、检查是不是CTAB不好用，2、同样的样品换引物扩增试试，3、调节退火温度和扩增时间，或者调换酶

解决了，谢谢。是DNA浓度太高导致的。

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3楼2016-10-16 17:25:39
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hqxhss

新虫 (小有名气)
请问，你这个是PCR之后的图吗，我想说我手提的DNA就是这样子的图，降解了，一直没找到原因，请问你有遇到这个问题吗？怎么解决的呢？
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4楼2016-10-18 19:37:42
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天晴了！

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hqxhss at 2016-10-18 19:37:42
请问，你这个是PCR之后的图吗，我想说我手提的DNA就是这样子的图，降解了，一直没找到原因，请问你有遇到这个问题吗？怎么解决的呢？

嗯，是PCR之后的图，但我的产物跑成这样是因为DNA浓度太高导致的，稀释后就好了。不知道你的是不是？

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5楼2016-10-22 17:24:00
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乔治George

新虫 (初入文坛)
DNA 降解-1

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6楼2016-12-04 23:16:16
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乔治George

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 乔治George at 2016-12-04 23:16:16

我跑出来的带是这样的，不知道是不是跟你的是同一种情况

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7楼2016-12-04 23:17:23
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乔治George

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 天晴了！ at 2016-10-22 17:24:00
嗯，是PCR之后的图，但我的产物跑成这样是因为DNA浓度太高导致的，稀释后就好了。不知道你的是不是？
...

请问你是怎么稀释的？

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8楼2016-12-04 23:18:39
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零时以南

新虫 (小有名气)
DNA 降解-2

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10楼2017-11-08 20:36:13
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