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天晴了!

新虫 (小有名气)

[求助] DNA 降解已有1人参与

怀疑DNA 降解,PCR 扩增产物没有条带,用CTAB 法提取的DNA, 引物是新稀释的,退火温度60,PCR 体系15ul, 模板1ul, 引物1ul 。同一引物每两孔一个样,个别不是。1%的琼脂糖电泳,但这次的模板是新提的,是不是又降解了?原因是什么呢?怎样避免呢?请各位广大的虫友们帮帮忙吧!

DNA 降解


@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kuaile5420: 金币+2, 欢迎发帖交流 2016-09-25 16:33:31
1、检查是不是CTAB不好用,2、同样的样品换引物扩增试试,3、调节退火温度和扩增时间,或者调换酶

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不是优秀,而是不可替代
2楼2016-09-25 10:49:09
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天晴了!

新虫 (小有名气)

9楼2016-12-05 20:50:53
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天晴了!

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by didongwei at 2016-09-25 10:49:09
1、检查是不是CTAB不好用,2、同样的样品换引物扩增试试,3、调节退火温度和扩增时间,或者调换酶

解决了,谢谢。是DNA浓度太高导致的。

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3楼2016-10-16 17:25:39
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hqxhss

新虫 (小有名气)

请问,你这个是PCR之后的图吗,我想说我手提的DNA就是这样子的图,降解了,一直没找到原因,请问你有遇到这个问题吗?怎么解决的呢?
4楼2016-10-18 19:37:42
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天晴了!

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hqxhss at 2016-10-18 19:37:42
请问,你这个是PCR之后的图吗,我想说我手提的DNA就是这样子的图,降解了,一直没找到原因,请问你有遇到这个问题吗?怎么解决的呢?

嗯,是PCR之后的图,但我的产物跑成这样是因为DNA浓度太高导致的,稀释后就好了。不知道你的是不是?

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5楼2016-10-22 17:24:00
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乔治George

新虫 (初入文坛)

6楼2016-12-04 23:16:16
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乔治George

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 乔治George at 2016-12-04 23:16:16

我跑出来的带是这样的,不知道是不是跟你的是同一种情况

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7楼2016-12-04 23:17:23
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乔治George

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 天晴了! at 2016-10-22 17:24:00
嗯,是PCR之后的图,但我的产物跑成这样是因为DNA浓度太高导致的,稀释后就好了。不知道你的是不是?
...

请问你是怎么稀释的?

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8楼2016-12-04 23:18:39
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零时以南

新虫 (小有名气)

10楼2017-11-08 20:36:13
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