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张小蛋

新虫 (小有名气)

[求助] 连接体系中的摩尔比,体积比如何算 已有2人参与

连接体系中的摩尔比应该指的是摩尔浓度比,假如目的片段和载体大小分别为600bp和1900bp,跑胶后发现目的片段和载体亮度一样,是否可以认为质量浓度相同,假设为50ng/ml,接下来该怎么计算它们的摩尔浓度比,体积比该怎么算?在10ul体系,1.5ulT4buffer,0.5ul连接酶,目的片段载体体积该各加多少呢?能否做出详细的解释,望众大神解惑~

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jessica518

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
张小蛋: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 感谢您! 2016-09-23 10:56:22
摩尔=质量/分子量
假如回收的片段和载体体积是一样的。
片段的摩尔数=50/600
载体的摩尔数=50/1900
假如需要片段与载体的摩尔比4:1,则加入的片段与载体的体积比=[4*(50/1900]/(50/600):1=1.26:1
8楼2016-09-22 14:26:53
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阿静

金虫 (正式写手)

最简单的就是载体为0.02pmol×载体的bp算得体系中载体所加的ng,而目的片段为载体的3~10倍,即0.06~0.2×目的片段bp=体系中目的片段的ng数

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又将踏入新的旅程
10楼2016-10-20 02:09:51
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普通回帖

梦想天行

木虫 (职业作家)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-22 07:52:00
各2ul,其他补水!

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2楼2016-09-21 20:19:51
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-22 07:52:07
目的片段和载体各3ul,补水2ul.

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3楼2016-09-21 20:21:03
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张小蛋

新虫 (小有名气)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-22 07:52:14
内容已删除
4楼2016-09-22 06:57:46
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-22 07:52:20
张小蛋: 金币+50, 有帮助, 感谢您! 2016-09-23 10:56:49
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张小蛋 at 2016-09-22 06:57:46
具体怎么算的呢?可否告知~
...

控制的摩尔数比例是1:1

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5楼2016-09-22 07:13:57
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张小蛋

新虫 (小有名气)

内容已删除
6楼2016-09-22 07:56:38
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

new england上有计算的,查T4

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7楼2016-09-22 10:13:39
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张小蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by jessica518 at 2016-09-22 14:26:53
摩尔=质量/分子量
假如回收的片段和载体体积是一样的。
片段的摩尔数=50/600
载体的摩尔数=50/1900
假如需要片段与载体的摩尔比4:1,则加入的片段与载体的体积比=/(50/600):1=1.26:1

仔细看了一下,最后这个体积比,怎么算都像是载体比插入片段的体积比啊?

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9楼2016-10-14 15:03:00
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