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123144859_22

新虫 (初入文坛)

[求助] 猪皮胶原的分型

各位大侠,我是从猪皮中提取胶原,因为要得到I型胶原,我按照文献中的方法,用0.1M的NaOH和10%的正丁醇去除杂蛋白和脂肪后,加入胃蛋白酶酶溶,提取出来的胶原经离心、盐析、透析和冷冻干燥后,得到白色海绵状的胶原海绵;接下去我按照资料中的方法,将海绵溶解到0.05M中的醋酸中,加入1.6M的NaCl后,有蛋白析出(1),放置一天,离心,取上清液,再加入NaCl的时候就没有蛋白析出了。  也就是我分型不成功,失败了。  各位大侠能帮我看看我哪里出现问题了吗?按照文献中的方法,NaCl为1.6M时,析出的应该为Ⅲ型胶原,为2M时,析出的为Ⅳ型胶原;2.6M时,析出的为I型胶原,
可是我第二步的时候就没有胶原析出了。
  在做实验的过程中,我感觉第一步离心的时候,上清液就很清,没有胶原溶液那种粘稠的感觉了,沉淀的量也跟我加入的量差不多了,感觉胶原在第一步全部析出了。

  我只有这么多金币了,麻烦各位大侠帮忙了,谢谢
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牛溪梦

新虫 (初入文坛)

你第一步盐析能析出蛋白,我做的是第一次盐析就没有蛋白析出,在4℃直接变成了凝胶,这是怎么回事?你遇到过不
2楼2017-04-05 12:51:41
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soulfung

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2017-06-29 06:52:26
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amy513

新虫 (初入文坛)

你看看是在酸性还是中性条件下

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4楼2018-06-13 16:20:56
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amy513

新虫 (初入文坛)

你的参考文献我能看一下嘛!不同PH下盐析条件不同!

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5楼2018-06-13 16:22:07
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