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新虫 (初入文坛)

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虫号: 1190029
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专业: 康复医学

[求助] 猪皮胶原的分型

各位大侠，我是从猪皮中提取胶原，因为要得到I型胶原，我按照文献中的方法，用0.1M的NaOH和10%的正丁醇去除杂蛋白和脂肪后，加入胃蛋白酶酶溶，提取出来的胶原经离心、盐析、透析和冷冻干燥后，得到白色海绵状的胶原海绵；接下去我按照资料中的方法，将海绵溶解到0.05M中的醋酸中，加入1.6M的NaCl后，有蛋白析出（1），放置一天，离心，取上清液，再加入NaCl的时候就没有蛋白析出了。  也就是我分型不成功，失败了。  各位大侠能帮我看看我哪里出现问题了吗？按照文献中的方法，NaCl为1.6M时，析出的应该为Ⅲ型胶原，为2M时，析出的为Ⅳ型胶原；2.6M时，析出的为I型胶原，
可是我第二步的时候就没有胶原析出了。
  在做实验的过程中，我感觉第一步离心的时候，上清液就很清，没有胶原溶液那种粘稠的感觉了，沉淀的量也跟我加入的量差不多了，感觉胶原在第一步全部析出了。

  我只有这么多金币了，麻烦各位大侠帮忙了，谢谢

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