应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » dna条带
81/1返回列表
查看: 1228  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小肉xxh

新虫 (初入文坛)

[求助] dna条带 已有2人参与

提取蛾子的dna做coii基因的pcr后，跑胶dna条带为什么这么乱

dna条带


@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-17 13:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-18 09:02:56
先看条带里有没有你的目标带，一般引物特异性差或退火温度过低均会造成非特异性扩增而出现多条带。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-09-18 00:59:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-18 09:03:04
回忆一下，PCR反应过程中是否有过断电情况，如果没有，请检查你的引物特异性。从你的图片来看，应该是产物不单一，如果引物特异性没有问题，且PCR过程中一切正常，建议切下条带，胶回收后测序（PS：就用你扩增引物测序就可以）。如未阐述明白，可继续追问，祝好
赞一下(1人) 回复此楼
不是优秀，而是不可替代
3楼2016-09-18 08:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小肉xxh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by didongwei at 2016-09-18 08:41:23
回忆一下，PCR反应过程中是否有过断电情况，如果没有，请检查你的引物特异性。从你的图片来看，应该是产物不单一，如果引物特异性没有问题，且PCR过程中一切正常，建议切下条带，胶回收后测序（PS：就用你扩增引物测 ...

线粒体COII基因：PCR扩增引物为针对鳞翅目设计的引物，反应程序参考刘晓燕等（2007）
正向引物EVA：5' GAGACCATTACTTGCTTTCAGTCACT 3'
反向引物PATRICK：5' CTAATATGGCAGATTATATGTATTGG 3'
PCR反应程序：94 ℃预变性1 min；94 ℃变性1min，45 ℃复性1min30s，72 ℃延伸1 min15s，6个循环；94 ℃变性1min，51 ℃复性1min30s，72 ℃延伸1 min15s，36个循环；72 ℃延伸5 min；12℃forever
这是为什么 都跑到100bp了   maker2000
dna条带-1



发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-10-15 21:55:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小肉xxh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by didongwei at 2016-09-18 08:41:23
回忆一下，PCR反应过程中是否有过断电情况，如果没有，请检查你的引物特异性。从你的图片来看，应该是产物不单一，如果引物特异性没有问题，且PCR过程中一切正常，建议切下条带，胶回收后测序（PS：就用你扩增引物测 ...

这是图
dna条带-2



发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-15 22:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小肉xxh at 2016-10-15 22:06:53
这是图

...

你的问题嘞？条带不清晰？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
不是优秀，而是不可替代
6楼2016-10-15 22:08:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小肉xxh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by didongwei at 2016-10-15 22:08:06
你的问题嘞？条带不清晰？
...

那个应该跑到maker的第三条带，可是都到100得条带了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-10-15 22:10:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小肉xxh at 2016-10-15 22:10:10
那个应该跑到maker的第三条带，可是都到100得条带了
...

你的不是跑到100bp啦，100bp那是引物二聚体或者DNA片段，从你的电泳图看，我认为是复性温度太低，导致特异性差

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
不是优秀，而是不可替代
8楼2016-10-15 22:12:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小肉xxh 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 09:38 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:38 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:14 by C79jjtjAKjEn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:14 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:49 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:26 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 05:22 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-15 05:01 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 01:21 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭