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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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winyuyuyu123

金虫 (小有名气)

[求助] 萌新求助各位大神,帮我分析下Southern的结果,小条带都弥散了显示不出来,急!!!

如题,Southern实验,检测我的探针(大小约300bp),Marker在2KB以下的条带全弥散了看不见,我的探针也是一坨,根本不成一条带,有木有大神遇见过类似的情况啊,帮我分析下原因,谢谢了!泳道1:未标记的Marker;泳道2:Dig标记的Marker;泳道3:探针。重复了几次,每次都是这样!

萌新求助各位大神,帮我分析下Southern的结果,小条带都弥散了显示不出来,急!!!
2016.9.5-2.jpg
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armigera

金虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by winyuyuyu123 at 2016-09-19 11:57:31
是的,有可能是显色比较灵敏,但是同样的500bp的Marker应该显色也很灵敏,Marker的小条带不应该完全看不出来的,从转膜结果看,500bp的条带没有转膜完全,但是连2kb的都显示清晰了呢。。。其实我想确定一下到底是不 ...

有很多方法可以满足你的要求,但都没法进行后续实验,显色过后的膜也就不能再用了。比如,常见的,你可以用传统的DAB显色,或者用碱性磷酸酶与bcip+nip(?我太确定这两个名字),总之有很多,他们显色的结果直接显示在膜上,一旦曝光过度就要重新做实验。其实也可以怀疑marker降解了,这个只是一个猜测。

发自小木虫Android客户端
11楼2016-09-20 05:20:19
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:23
请问楼主为何要标记marker?不是直接将探针点在尼龙膜上检测吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
jiayoubashaonian
2楼2016-09-14 11:24:14
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winyuyuyu123

金虫 (小有名气)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:29
引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2016-09-14 11:24:14
请问楼主为何要标记marker?不是直接将探针点在尼龙膜上检测吗?

我不是要标记marker,我的意思是那个marker就是含有地高辛的southern用的marker,但是我显色时发现小片段显不出来

发自小木虫Android客户端
3楼2016-09-14 11:31:32
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:34
探针的有可能是信号太强
jiayoubashaonian
4楼2016-09-14 11:33:23
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