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winyuyuyu123金虫 (小有名气)
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萌新求助各位大神，帮我分析下Southern的结果，小条带都弥散了显示不出来，急！！！
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如题，Southern实验，检测我的探针（大小约300bp），Marker在2KB以下的条带全弥散了看不见，我的探针也是一坨，根本不成一条带，有木有大神遇见过类似的情况啊，帮我分析下原因，谢谢了！泳道1：未标记的Marker；泳道2：Dig标记的Marker；泳道3：探针。重复了几次，每次都是这样！ 2016.9.5-2.jpg |
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4楼2016-09-14 11:33:23
winyuyuyu123
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我不是要标记marker，我的意思是那个marker就是含有地高辛的southern用的marker，但是我显色时发现小片段显不出来 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-09-14 11:31:32
armigera
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其实你的探针泳道还好，就是上样量有点多，或者减少显色时间。至于marker，有没有可能本身就有问题呢，因为从跑胶的图来看，好像小条带都弥散到看不出来。或者显色液只淋了膜的下半部？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-09-16 14:17:35
armigera
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有很多方法可以满足你的要求，但都没法进行后续实验，显色过后的膜也就不能再用了。比如，常见的，你可以用传统的DAB显色，或者用碱性磷酸酶与bcip+nip(?我太确定这两个名字)，总之有很多，他们显色的结果直接显示在膜上，一旦曝光过度就要重新做实验。其实也可以怀疑marker降解了，这个只是一个猜测。 发自小木虫Android客户端 |
11楼2016-09-20 05:20:19
blackrose8089
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2楼2016-09-14 11:24:14
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可是探针和marker都是这样，看marker上面2kb的条带挺正常的，小条带就不见了，我怀疑是不是转膜的时候弄散的 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-09-14 11:41:09
winyuyuyu123
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7楼2016-09-18 13:53:24
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southern的探针检测本来就很灵敏，跑胶看不出来的条带或弥散不代表没有，探针完全可以抗的出来。不然就没人做southern了，直接跑胶就可以了。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-09-18 16:42:41
xn8008: 屏蔽内容, 违规存档 2016-09-19 13:59:12
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9楼2016-09-18 18:02:36
winyuyuyu123
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