| 查看: 2243 | 回复: 13 | ||
winyuyuyu123金虫 (小有名气)
|
[求助]
萌新求助各位大神，帮我分析下Southern的结果，小条带都弥散了显示不出来，急！！！
|
|
如题，Southern实验，检测我的探针（大小约300bp），Marker在2KB以下的条带全弥散了看不见，我的探针也是一坨，根本不成一条带，有木有大神遇见过类似的情况啊，帮我分析下原因，谢谢了！泳道1：未标记的Marker；泳道2：Dig标记的Marker；泳道3：探针。重复了几次，每次都是这样！ 2016.9.5-2.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10637.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3702
- 在线: 790.1小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
4楼2016-09-14 11:33:23
winyuyuyu123
金虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 813.3
- 红花: 2
- 帖子: 68
- 在线: 25.3小时
- 虫号: 4912791
- 注册: 2016-08-12
- 专业: 病原真菌学
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:29
|
我不是要标记marker，我的意思是那个marker就是含有地高辛的southern用的marker，但是我显色时发现小片段显不出来 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-09-14 11:31:32
armigera
金虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 3429.6
- 散金: 15
- 红花: 20
- 帖子: 756
- 在线: 113.5小时
- 虫号: 1975949
- 注册: 2012-09-05
- 性别: GG
- 专业: 发育生物学
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-18 22:33:44
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:45
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-18 22:33:44
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:45
|
其实你的探针泳道还好，就是上样量有点多，或者减少显色时间。至于marker，有没有可能本身就有问题呢，因为从跑胶的图来看，好像小条带都弥散到看不出来。或者显色液只淋了膜的下半部？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-09-16 14:17:35
armigera
金虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 3429.6
- 散金: 15
- 红花: 20
- 帖子: 756
- 在线: 113.5小时
- 虫号: 1975949
- 注册: 2012-09-05
- 性别: GG
- 专业: 发育生物学
|
有很多方法可以满足你的要求，但都没法进行后续实验，显色过后的膜也就不能再用了。比如，常见的，你可以用传统的DAB显色，或者用碱性磷酸酶与bcip+nip(?我太确定这两个名字)，总之有很多，他们显色的结果直接显示在膜上，一旦曝光过度就要重新做实验。其实也可以怀疑marker降解了，这个只是一个猜测。 发自小木虫Android客户端 |
11楼2016-09-20 05:20:19
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10637.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3702
- 在线: 790.1小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
2楼2016-09-14 11:24:14
winyuyuyu123
金虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 813.3
- 红花: 2
- 帖子: 68
- 在线: 25.3小时
- 虫号: 4912791
- 注册: 2016-08-12
- 专业: 病原真菌学
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-19 13:58:39
|
可是探针和marker都是这样，看marker上面2kb的条带挺正常的，小条带就不见了，我怀疑是不是转膜的时候弄散的 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-09-14 11:41:09
winyuyuyu123
金虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 813.3
- 红花: 2
- 帖子: 68
- 在线: 25.3小时
- 虫号: 4912791
- 注册: 2016-08-12
- 专业: 病原真菌学
7楼2016-09-18 13:53:24
armigera
金虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 3429.6
- 散金: 15
- 红花: 20
- 帖子: 756
- 在线: 113.5小时
- 虫号: 1975949
- 注册: 2012-09-05
- 性别: GG
- 专业: 发育生物学
【答案】应助回帖
★ ★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-18 22:34:03
xn8008: 应助指数+1 2016-09-19 13:59:05
winyuyuyu123: 金币+1, ★有帮助 2016-09-20 09:59:00
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-18 22:34:03
xn8008: 应助指数+1 2016-09-19 13:59:05
winyuyuyu123: 金币+1, ★有帮助 2016-09-20 09:59:00
|
southern的探针检测本来就很灵敏，跑胶看不出来的条带或弥散不代表没有，探针完全可以抗的出来。不然就没人做southern了，直接跑胶就可以了。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-09-18 16:42:41
xn8008: 屏蔽内容, 违规存档 2016-09-19 13:59:12
|
本帖内容被屏蔽 |
9楼2016-09-18 18:02:36
winyuyuyu123
金虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 813.3
- 红花: 2
- 帖子: 68
- 在线: 25.3小时
- 虫号: 4912791
- 注册: 2016-08-12
- 专业: 病原真菌学
10楼2016-09-19 11:57:31
10