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armigera

金虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by winyuyuyu123 at 2016-09-19 11:57:31
是的,有可能是显色比较灵敏,但是同样的500bp的Marker应该显色也很灵敏,Marker的小条带不应该完全看不出来的,从转膜结果看,500bp的条带没有转膜完全,但是连2kb的都显示清晰了呢。。。其实我想确定一下到底是不 ...

有很多方法可以满足你的要求,但都没法进行后续实验,显色过后的膜也就不能再用了。比如,常见的,你可以用传统的DAB显色,或者用碱性磷酸酶与bcip+nip(?我太确定这两个名字),总之有很多,他们显色的结果直接显示在膜上,一旦曝光过度就要重新做实验。其实也可以怀疑marker降解了,这个只是一个猜测。

发自小木虫Android客户端
11楼2016-09-20 05:20:19
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winyuyuyu123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by armigera at 2016-09-20 05:20:19
有很多方法可以满足你的要求,但都没法进行后续实验,显色过后的膜也就不能再用了。比如,常见的,你可以用传统的DAB显色,或者用碱性磷酸酶与bcip+nip(?我太确定这两个名字),总之有很多,他们显色的结果直接显示 ...

确实有可能是显色的时间太长,不过我对CPSD显色没什么经验,我是在37℃孵育了10min后去照的,这么说的话,我可以缩短孵育时间试试?不知道大家用CPSD显色的经验如何?
12楼2016-09-20 09:57:21
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小狮子啦啦

新虫 (小有名气)

楼主,我的是跑的阳性像你的marker一样,成一坨了,检测探针要这样做么?我只是按说明书检测了标记效率,不知道你把探针转膜是为了什么?我只是单纯想请教一下

发自小木虫Android客户端
13楼2016-09-26 15:43:04
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winyuyuyu123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 小狮子啦啦 at 2016-09-26 15:43:04
楼主,我的是跑的阳性像你的marker一样,成一坨了,检测探针要这样做么?我只是按说明书检测了标记效率,不知道你把探针转膜是为了什么?我只是单纯想请教一下

实验目的不太相同吧,说来话长,我的实验需要检测几个不同长度的小片段探针。你的阳性是什么呢?我的Marker下面一团胡,根本看不出来个啥,都不敢进行下游的实验了。不知道有什么解决方法
14楼2016-09-27 08:34:57
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