| 查看: 1092 | 回复: 5 | ||
liling0601铜虫 (小有名气)
|
[求助]
基因扩增 已有2人参与
|
| 近期做一个1000bp的小片段扩增，结果非目的条带比目的条带亮很多，挑5个单菌落测序回来，5个都一样，和引物比对发现测序结果的引物倒数第二个碱基由A变成了T，请问这是引物设计问题还是退火温度设计的不合适？如何调整 |
回复此楼» 猜你喜欢
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有235人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
010308Jing
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 3149.2
- 散金: 73
- 红花: 6
- 帖子: 552
- 在线: 125.1小时
- 虫号: 2146845
- 注册: 2012-11-25
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2016-09-12 16:29:01
3楼2016-09-12 20:55:56
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-13 08:11:16
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-13 08:11:16
|
It is not accurate in the primer annealing, and the PCR system is error prong. You can use your system to do mutagenesis now. I am not kidding. But if you do not need a mutagenesis PCR, so adjust all conditions of PCR including primer design to stricken the PCR. You need to know the rules to design the PCR, besides, PCR buffer and concentration, anealing temperature, etc all must be optimized. Please let me know if you cannot make it work. |
4楼2016-09-13 00:14:11
juzhixianwei
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 370.5
- 帖子: 28
- 在线: 28小时
- 虫号: 1837107
- 注册: 2012-05-28
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2016-09-13 12:39:07
6楼2016-09-13 20:42:07