8楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-08 08:45:13
BL21 competent cell is not working, got to make new cells. order new competent cell or try different protocol for making competent cell.

12楼: Originally posted by misang at 2016-09-08 11:22:59
如果感受态没有问题啊话，我建议你再多等一天看看能不能长出菌

6楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 08:33:07
涂板菌液的量也做了不同的  20微升，50微升，100微升，500微升，哪个都没长…………我还拿空载做了对照  也没长  但是同时做的空载转DH5α的对照长了菌  难道我的感受态有问题？？可都是新买的...

5楼: Originally posted by renren2004a at 2016-09-07 10:41:45
考虑一下感受态有没问题，抗生素有没有用错，一般转质粒的话还是很容易转化的。

14楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 12:46:24
两个是用的同一种抗生素吗？抗生素失效了？或者你转化的时候，质粒和菌多摇一会儿，可能你那个转化效率较低
...

16楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 12:50:33
抗生素都是最近配的  

还有一个现象忘了说  就是复苏那一步之后  我发现培养基里有沉淀  就好像是菌都沉到下面了  然后我晃了晃又混匀涂的板子...

17楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 13:13:52
从摇床复苏拿出培养基直接涂板子吗？取个1mL或2ml，离心富集一下，然后加一定量的培养液清洗离心，再加培养液吹打混匀，取一定量涂板子。...

18楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 13:29:34
清洗的目的是什么呢？我没有清洗  都是直接涂  如果体积较多会离心吸出一部分培养基再涂...