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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
送红花一朵
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8楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-08 08:45:13
BL21 competent cell is not working, got to make new cells. order new competent cell or try different protocol for making competent cell.

Thanks for your advice.
It now appears that my competent cell has a problem.
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11楼2016-09-08 10:26:58
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misang

新虫 (正式写手)
如果感受态没有问题啊话，我建议你再多等一天看看能不能长出菌

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12楼2016-09-08 11:22:59
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
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12楼: Originally posted by misang at 2016-09-08 11:22:59
如果感受态没有问题啊话，我建议你再多等一天看看能不能长出菌

嗯嗯  现在平板还放在培养箱里  不过我估计是够呛了…………
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13楼2016-09-08 12:45:54
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tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 08:33:07
涂板菌液的量也做了不同的  20微升，50微升，100微升，500微升，哪个都没长…………我还拿空载做了对照  也没长  但是同时做的空载转DH5α的对照长了菌  难道我的感受态有问题？？可都是新买的...

两个是用的同一种抗生素吗？抗生素失效了？或者你转化的时候，质粒和菌多摇一会儿，可能你那个转化效率较低

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十四_14
14楼2016-09-08 12:46:24
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
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5楼: Originally posted by renren2004a at 2016-09-07 10:41:45
考虑一下感受态有没问题，抗生素有没有用错，一般转质粒的话还是很容易转化的。

可能就是感受态的问题吧
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15楼2016-09-08 12:47:53
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
送红花一朵
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14楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 12:46:24
两个是用的同一种抗生素吗？抗生素失效了？或者你转化的时候，质粒和菌多摇一会儿，可能你那个转化效率较低
...

抗生素都是最近配的  

还有一个现象忘了说  就是复苏那一步之后  我发现培养基里有沉淀  就好像是菌都沉到下面了  然后我晃了晃又混匀涂的板子
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16楼2016-09-08 12:50:33
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tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 12:50:33
抗生素都是最近配的  

还有一个现象忘了说  就是复苏那一步之后  我发现培养基里有沉淀  就好像是菌都沉到下面了  然后我晃了晃又混匀涂的板子...

从摇床复苏拿出培养基直接涂板子吗？取个1mL或2ml，离心富集一下，然后加一定量的培养液清洗离心，再加培养液吹打混匀，取一定量涂板子。
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17楼2016-09-08 13:13:52
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 13:13:52
从摇床复苏拿出培养基直接涂板子吗？取个1mL或2ml，离心富集一下，然后加一定量的培养液清洗离心，再加培养液吹打混匀，取一定量涂板子。...

清洗的目的是什么呢？我没有清洗  都是直接涂  如果体积较多会离心吸出一部分培养基再涂
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18楼2016-09-08 13:29:34
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tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 13:29:34
清洗的目的是什么呢？我没有清洗  都是直接涂  如果体积较多会离心吸出一部分培养基再涂...

如果你摇菌用的培养基和涂板子用的培养基不同可以清洗一下，相同的话倒是无所谓。
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19楼2016-09-08 14:59:22
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star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以提供这些技术服务

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20楼2016-09-08 15:45:40
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