应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化实验一直不成功 找不到原因
432/5返回列表上一页12345下一页
查看: 7004  |  回复: 42
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

十四_14

荣誉版主 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-08 08:45:13
BL21 competent cell is not working, got to make new cells. order new competent cell or try different protocol for making competent cell.

Thanks for your advice.
It now appears that my competent cell has a problem.
赞一下 回复此楼
11楼2016-09-08 10:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misang

新虫 (正式写手)
如果感受态没有问题啊话，我建议你再多等一天看看能不能长出菌

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
12楼2016-09-08 11:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十四_14

荣誉版主 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by misang at 2016-09-08 11:22:59
如果感受态没有问题啊话，我建议你再多等一天看看能不能长出菌

嗯嗯  现在平板还放在培养箱里  不过我估计是够呛了…………
赞一下 回复此楼
13楼2016-09-08 12:45:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 08:33:07
涂板菌液的量也做了不同的  20微升，50微升，100微升，500微升，哪个都没长…………我还拿空载做了对照  也没长  但是同时做的空载转DH5α的对照长了菌  难道我的感受态有问题？？可都是新买的...

两个是用的同一种抗生素吗？抗生素失效了？或者你转化的时候，质粒和菌多摇一会儿，可能你那个转化效率较低

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

十四_14
14楼2016-09-08 12:46:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十四_14

荣誉版主 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by renren2004a at 2016-09-07 10:41:45
考虑一下感受态有没问题，抗生素有没有用错，一般转质粒的话还是很容易转化的。

可能就是感受态的问题吧
赞一下 回复此楼
15楼2016-09-08 12:47:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十四_14

荣誉版主 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 12:46:24
两个是用的同一种抗生素吗？抗生素失效了？或者你转化的时候，质粒和菌多摇一会儿，可能你那个转化效率较低
...

抗生素都是最近配的  

还有一个现象忘了说  就是复苏那一步之后  我发现培养基里有沉淀  就好像是菌都沉到下面了  然后我晃了晃又混匀涂的板子
赞一下 回复此楼
16楼2016-09-08 12:50:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 12:50:33
抗生素都是最近配的  

还有一个现象忘了说  就是复苏那一步之后  我发现培养基里有沉淀  就好像是菌都沉到下面了  然后我晃了晃又混匀涂的板子...

从摇床复苏拿出培养基直接涂板子吗？取个1mL或2ml，离心富集一下，然后加一定量的培养液清洗离心，再加培养液吹打混匀，取一定量涂板子。
赞一下 回复此楼
17楼2016-09-08 13:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十四_14

荣誉版主 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 13:13:52
从摇床复苏拿出培养基直接涂板子吗？取个1mL或2ml，离心富集一下，然后加一定量的培养液清洗离心，再加培养液吹打混匀，取一定量涂板子。...

清洗的目的是什么呢？我没有清洗  都是直接涂  如果体积较多会离心吸出一部分培养基再涂
赞一下 回复此楼
18楼2016-09-08 13:29:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tayifeita

木虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 13:29:34
清洗的目的是什么呢？我没有清洗  都是直接涂  如果体积较多会离心吸出一部分培养基再涂...

如果你摇菌用的培养基和涂板子用的培养基不同可以清洗一下，相同的话倒是无所谓。
赞一下 回复此楼
19楼2016-09-08 14:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)
我们公司可以提供这些技术服务

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
20楼2016-09-08 15:45:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 十四_14 的主题更新
432/5返回列表上一页12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 今年审到国自然15份，谈谈感受 +22 国自然国社科中 2026-05-17 23/1150 2026-05-21 20:08 by botar
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 6/300 2026-05-21 15:09 by 982564
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[教师之家] 上海大学实验技术岗位非升即走 +12 嘻嘻哈哈乐呵呵 2026-05-15 13/650 2026-05-20 08:34 by xli1984
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[考博] 26/27申博自荐-锂/钠电池方向 5+3 狗头军师. 2026-05-15 4/200 2026-05-19 09:10 by moonboat
[基金申请] 同样的基金本子，换个专家直接从C变A！ (金币-10) +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[文学芳草园] 半夜喝咖啡 +3 myrtle 2026-05-15 5/250 2026-05-18 01:03 by 小沈2018
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人（2026.09） +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭