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十四_14

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19楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 14:59:22
如果你摇菌用的培养基和涂板子用的培养基不同可以清洗一下，相同的话倒是无所谓。...

这样啊~~
谢谢你！！

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21楼2016-09-08 16:20:47

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renren2004a

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 08:33:07
涂板菌液的量也做了不同的 20微升，50微升，100微升，500微升，哪个都没长…………我还拿空载做了对照也没长但是同时做的空载转DH5α的对照长了菌难道我的感受态有问题？？可都是新买的...

将感受态涂布不加抗生素的平板看看有没有生长。

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22楼2016-09-08 17:18:10

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wacx33

禁虫 (小有名气)

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23楼2016-09-08 22:44:44

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cm14704019

至尊木虫 (知名作家)

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我估计感受态有问题，你可以做个对照看看

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24楼2016-09-08 23:55:08

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warkan

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25楼2016-09-08 23:57:23

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Wawa521

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26楼2016-09-09 01:02:29

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armigera

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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-09-09 22:34:05

首先，你确定DH5alpha中提取的质粒没问题，这说明你前面的克隆做对了，不用考虑连接或者是载体的问题。其次，BL21表达感受态不能被转化，但对照组的DH5alpha没问题，说明是BL21出了问题。那么问题找到了。如果你确定这个是BL21或者你能弄到BL21的话，可以自己做感受态，步骤和制作DH5alpha一样，都是很传统的分子实验。如果弄不到菌株，你可以跟老板说，你的表达片段里有很多稀有氨基酸，BL21不能满足需要，需要更换其他菌株，能说通的话这事就成了。祝好运！

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27楼2016-09-09 01:58:15

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