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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于PCR
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RNA世界

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于PCR 已有2人参与

本人近期在做半定量PCR
同样的一批cDNA，之前P得都挺好，最近突然P不出来了。
引物没有换，模板没有换，PCR程序没有变。只是之前的引物用完了所以重新合成了一批。
Actin内参P出来都是没有问题的。
求助各位大神，这会是哪个方面的原因呢？？
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谋事在人，成事在天
1楼 2016-09-06 20:26:56
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534720018

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by RNA世界 at 2016-09-08 11:16:39
请问这个该如何看呢？
RNA跑胶吗？...

模板直接跑胶

发自小木虫IOS客户端
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10楼2016-09-08 15:07:06
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
照这样说只能是引物的问题了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-09-07 09:12:12
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RNA世界

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xrxleisure at 2016-09-07 09:12:12
照这样说只能是引物的问题了

但是阳性对照是可以P出来的啊？
赞一下 回复此楼
谋事在人，成事在天
3楼2016-09-07 10:20:52
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295249857

新虫 (初入文坛)
一个体系里 就加了模板，引物，酶，dNTP，从你说的内参可以P出来，我觉得酶和dNTP应该是没问题的，可能是引物合成出问题了，或者你的模板降解了，内参可能比目的基因扩的片段短，所以能P出来
赞一下 回复此楼
4楼2016-09-07 15:53:44
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