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huihey

新虫 (初入文坛)

[求助] 5 已有3人参与

求助各位,PCR电泳无条带Maker有条带,其他的都无条带,做了四次都是这个结果,自己实在找不到原因,第一次做分子实验,求帮助

5


5-1


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huihey

新虫 (初入文坛)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:13:10
2楼2016-09-05 21:55:20
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hongbaojiang

新虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:13:16
建议用一种现成的mix,叫Taq master mix,试试!

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3楼2016-09-05 22:04:59
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:13:22
先仔细检查一遍加的量和程序,没问题的话把用到的东西,包括模板,水,各种实际全换一遍。
4楼2016-09-06 07:36:37
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18355306765

新虫 (小有名气)

我最近做的和你差不多,也没有条带出来

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5楼2016-09-06 23:10:09
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18242016312

新虫 (小有名气)

模板的问题,或者降低退火温度

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6楼2016-09-06 23:26:15
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king_knight

金虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-08 22:42:36
pcr扩不出来有很多的原因,有可能是引物的问题,也有可能是中间某个过程出错了,仔细检查下自己的操作,确认没问题,那就只好换引物了

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7楼2016-09-07 23:20:48
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yuy111

银虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-08 22:42:13
PCR 增加一个已知阳性对照,以排除pcr 系统问题。DNA电泳增加模板阳性对照,检查模板质量。
8楼2016-09-08 02:41:13
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

引物二聚体有嘛?没有的话,得考虑各种试剂降解或失效,都有可能的

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谨言慎行
9楼2016-09-08 08:05:21
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议在做的时候加入阳性对照,确定PCR体系是没有问题的。
坚持到底就是胜利!
10楼2016-09-08 10:48:01
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