| 查看: 991 | 回复: 2 | ||
1083123347银虫 (初入文坛)
|
[求助]
连接、转化后不长菌，求支招
|
|
载体骨架是通过pcr扩增得到的，然后进行双酶切（hind III 和kpnI）,酶切回收后约50ng/ul（长是3800bp） 目标片段是在T载体上，也进行双酶切（hind III 和kpnI），切胶回收是160ng/ul(长是2300bp) 用的是fermentas的T4连接酶，22℃连接1h 连接体系如下： 载体骨架 2ul 插入片段 1ul 水 14.5ul T4 buffer 2 T4酶 0.5ul ----------------------------- total 20ul 做转化后一个菌液没有长，做了四次了，载体和插入片段连接比例试过1:3,1:5,1:7，都没有菌落长出，求大神支招，还是我可能哪方面除了问题  |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有93人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
2楼2017-01-11 17:19:54
1083123347
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 182
- 帖子: 19
- 在线: 15.4小时
- 虫号: 2340034
- 注册: 2013-03-12
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
3楼2017-01-18 10:40:16
