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liuxinxin250

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助大神 为什么DNA电泳会弥散? 已有1人参与

我是用公司合成的小DNA链合成四面体,但是电泳条带总是弥散的。
难道是降解了?可是刚pcr完就去跑电泳了啊。
程序 95℃ 10min 4℃ foever
这已经是第三次了,之前没有结果还以为是buffer配的不对,现在看来不是啊
难道是我上样量太多? 10μL 因为上块5μL 没有什么信号
或者就是我用紫外分光光度计定量的时候就没定准???

求助大神 为什么DNA电泳会弥散?
20160820A.jpg
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sillyfoxzl

金虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-21 07:54:24
配胶的缓冲液跟电泳的缓冲盐浓度一样吗?建议重配电泳液试试

发自小木虫Android客户端
2楼2016-08-20 22:33:25
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汤圆zcy

新虫 (初入文坛)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-21 07:54:30
我也有这个问题,不知道怎么回事

发自小木虫Android客户端
3楼2016-08-21 00:08:11
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xuegyx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上样孔都还有DNA条带,可能是样品粘性太强或pH不对
4楼2016-08-22 11:57:06
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liuxinxin250

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sillyfoxzl at 2016-08-20 22:33:25
配胶的缓冲液跟电泳的缓冲盐浓度一样吗?建议重配电泳液试试

一样的,都是我自己配的,电泳用的1xTBE,配胶是10ml加了2ml  5x的TBE
5楼2016-08-26 18:05:31
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liuxinxin250

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xuegyx at 2016-08-22 11:57:06
上样孔都还有DNA条带,可能是样品粘性太强或pH不对

pH是因为Buffer影响的吗?
我是按照之前他们博士的毕业论文自己配置的TM buffer,调节pH为8.0,但是博士的就是单纯组成四面体,我又在单链上修饰了荧光染料再合成的四面体,按理说应该可以的啊···我也想不明白了。
难道是荧光染料影响的?
6楼2016-08-26 18:08:25
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