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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 试了多个条件的改变，PCR结果总是出现多条带，求助各位，谢谢。
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daylight0320

铜虫 (初入文坛)

[求助] 试了多个条件的改变，PCR结果总是出现多条带，求助各位，谢谢。 已有5人参与

目的条带1900bp，摸索改变来PCR退火温度（用的梯度PCR）,引物浓度，模板浓度，重新设计引物，结果总是有多条带，如下图（最右侧为marker）。也试了切胶回收近1900bp的条带，但是浓度达不到后续实验的要求。请问各位有什么建议吗？谢谢。

试了多个条件的改变，PCR结果总是出现多条带，求助各位，谢谢。


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1楼 2016-08-13 23:05:22
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010308Jing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by daylight0320 at 2016-08-14 11:16:01
在原来的退火温度上提高了，结果没有任何条带。
...

注主要pcr看不见摸不到，只能自己不停摸索了，你后续是做亚克隆吗？

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6楼2016-08-14 11:19:24
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010308Jing

木虫 (正式写手)
提高退货温度呢？

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2楼2016-08-14 09:00:21
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引物特异性不好，最好重新设计引物

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3楼2016-08-14 09:25:41
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daylight0320

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-08-14 09:00:21
提高退货温度呢？

在原来的退火温度上提高了，结果没有任何条带。

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4楼2016-08-14 11:16:01
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