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GST融合蛋白的分子量是多大呀 ?
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GST融合蛋白的分子量是多大呀 ?
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我做的GST融合蛋白的SDS-PAGE,GST蛋白说明书上说是27kD,我的目的蛋白在网上查的(uniprot)是29.8kD,,,如图所示,上清中有我的重组蛋白吗?
图_副本_副本.jpg
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13楼
:
Originally posted by
c269315986
at 2016-08-02 20:48:38
楼主您好,很抱歉我是新手研一还没开学没法回答您的问题,但我想问一下沉淀要怎么处理才能跑胶?
把5×loading buffer用水稀释成1×浓度,直接去重悬。开水一煮,沉淀里面的蛋白会溶解到里面,然后用清液上样就行了
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2016-08-03 00:21:39
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【答案】应助回帖
就是说你的蛋白可能因为截取有问题导致包涵体表达,做一个二级结构预测,去掉不适合表达的或者你有胞内区域没有去干净,要去干净才行。另外,GST上清不代表你的目的蛋白加GST就一定在上清,我还遇到过加MBP还是包涵体的呢
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2016-08-04 17:04:48
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2016-08-02 07:57:30
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2016-08-02 11:24:00
不是有吗,在沉淀里,包涵体的。。。。。。
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9楼
2016-08-02 08:00:03
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2016-08-02 11:24:08
引用回帖:
9楼
:
Originally posted by
781055707
at 2016-08-02 08:00:03
不是有吗,在沉淀里,包涵体的。。。。。。
怎么能获得有活性的蛋白呀?
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10楼
2016-08-02 10:11:17
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