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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » GST融合蛋白的分子量是多大呀 ？
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] GST融合蛋白的分子量是多大呀 ？ 已有6人参与

我做的GST融合蛋白的SDS-PAGE,GST蛋白说明书上说是27kD，我的目的蛋白在网上查的（uniprot）是29.8kD,,,如图所示，上清中有我的重组蛋白吗？

GST融合蛋白的分子量是多大呀 ？
图_副本_副本.jpg
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1楼 2016-08-01 18:26:38
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swgcpy

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by c269315986 at 2016-08-02 20:48:38
楼主您好，很抱歉我是新手研一还没开学没法回答您的问题，但我想问一下沉淀要怎么处理才能跑胶？

把5×loading buffer用水稀释成1×浓度，直接去重悬。开水一煮，沉淀里面的蛋白会溶解到里面，然后用清液上样就行了

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18楼2016-08-03 00:21:39
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sungel520

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

就是说你的蛋白可能因为截取有问题导致包涵体表达，做一个二级结构预测，去掉不适合表达的或者你有胞内区域没有去干净，要去干净才行。另外，GST上清不代表你的目的蛋白加GST就一定在上清，我还遇到过加MBP还是包涵体的呢
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31楼2016-08-04 17:04:48
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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2楼2016-08-01 18:44:29
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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3楼2016-08-01 19:38:50
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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4楼2016-08-01 21:53:59
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
5楼2016-08-01 22:19:56
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
6楼2016-08-01 23:10:01
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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7楼2016-08-01 23:38:17
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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8楼2016-08-02 07:57:30
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-02 11:24:00
不是有吗，在沉淀里，包涵体的。。。。。。
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采菊东篱下，悠然见南山。
9楼2016-08-02 08:00:03
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-02 11:24:08
引用回帖:
9楼: Originally posted by 781055707 at 2016-08-02 08:00:03
不是有吗，在沉淀里，包涵体的。。。。。。

怎么能获得有活性的蛋白呀？

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10楼2016-08-02 10:11:17
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