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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物污染问题 已有4人参与

做了菌液PCR,发现片段大小是对的,然后送去测序,发现都是空载体,老师怀疑是我引物污染,下面这张图是我对引物做的PCR,前11个为十一对引物,12 14 16为质粒PCR,13 15 16也事质粒对应的阴性对照。求大神分析

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没看到图。菌液PCR假阳性比例还是很高的,建议提质粒做个酶切验证再送测序。
2楼2016-07-27 10:11:00
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)

3楼2016-07-27 11:05:56
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-07-27 10:11:00
没看到图。菌液PCR假阳性比例还是很高的,建议提质粒做个酶切验证再送测序。

下面我附图了,帮我看下哈

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4楼2016-07-27 11:06:46
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 化蝶为谁舞 at 2016-07-27 11:06:46
下面我附图了,帮我看下哈
...

没看懂你的图,提质粒做个酶切验证吧。
5楼2016-07-27 12:34:49
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by stone2239 at 2016-07-27 12:34:49
没看懂你的图,提质粒做个酶切验证吧。...

目前我就是卡在酶切那块,提质粒做酶切,电泳检测啥都没有。。。很郁闷

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6楼2016-07-27 17:10:44
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 化蝶为谁舞 at 2016-07-27 17:10:44
目前我就是卡在酶切那块,提质粒做酶切,电泳检测啥都没有。。。很郁闷
...

那重新做连接转化吧
7楼2016-07-27 18:26:00
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by stone2239 at 2016-07-27 18:26:00
那重新做连接转化吧...

唉,那不一笑回到解放前了。。

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8楼2016-07-27 23:10:53
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css910320

银虫 (正式写手)

9楼2016-07-28 10:54:27
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heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
空载基本上是没有连接上,重新转化连接吧
10楼2016-07-28 12:09:57
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