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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物污染问题
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by css910320 at 2016-07-28 10:54:27
你做一个阴性对照

啊？阴性对照？

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11楼2016-07-28 22:56:48
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by heianduck at 2016-07-28 12:09:57
空载基本上是没有连接上,重新转化连接吧

嗯，只是不明白为啥菌落PCR条带那么亮，最后会是空载体

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12楼2016-07-28 22:58:09
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1157668076

新虫 (小有名气)
1415.1617pcr产物相同，阴性出了条带说明污染了，具体那一步还需要重新验证

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13楼2016-07-29 23:06:32
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13349308281

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 1157668076 at 2016-07-29 23:06:32
1415.1617pcr产物相同，阴性出了条带说明污染了，具体那一步还需要重新验证

做一个阴性对照，PCR过程中不加模板（也就是你的菌），如果还出现条带，那就是污染模板了，污染模板建议把PCR一套东西全部换新的。以前出现过不加模板，PCR可以出模板的现象，换掉所有PCR的东西记好了。
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14楼2016-07-31 10:30:12
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1501993727

金虫 (小有名气)
我也遇到过这种情况，水被污染了，稀释的引物也不能用

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15楼2016-07-31 11:05:24
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

估计连的就不对，重新做吧~如果考虑引物的问题，你可以重新合成一下
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···
16楼2016-07-31 12:43:37
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2282954162

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发现是空载体，只能重新连接转化了！！怀疑你引物是否污染，需要做一个空载体对照，就可以判定了
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心若没有栖息的地方，到哪里都是在流浪！
17楼2016-07-31 13:04:00
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岳大白

新虫 (初入文坛)
不一定是引物污染，水污染的可能性比较大，前段时间我也遇到了相应的问题。你换用哇哈哈的瓶装水，使用前灭一下菌。我就是这样解决的。

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18楼2016-07-31 19:34:22
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