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547star

木虫 (著名写手)

[求助] LIC克隆,T4 DNA聚合酶对平末端起作用吗? 已有1人参与

想设计一个LIC克隆,参考的资料多数用两个IIs内切酶,比如BsaI来切割,得到3`凹的粘性末端,然后再用T4 DNA聚合酶的3`-5`外切酶活性继续消化得到长的粘性末端。我现在想改用平端内切酶,比如EcoRV切割,不知道T4 DNA聚合酶在只有一种dNTP时,对平末端的双链DNA3-`5`的消化能力还有多强,足够做LIC克隆吗?
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为什么
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
547star: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 谢谢!那就放心试试! 2016-07-25 10:20:33
可以的,没有问题的。
2楼2016-07-25 07:43:29
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547star

木虫 (著名写手)

脑子转不过来。PCR产物就是平末端双链,可以被作用。
为什么
3楼2016-07-25 20:04:14
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