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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » LIC克隆，T4 DNA聚合酶对平末端起作用吗？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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547star

木虫 (著名写手)

[求助] LIC克隆，T4 DNA聚合酶对平末端起作用吗？ 已有1人参与

想设计一个LIC克隆，参考的资料多数用两个IIs内切酶，比如BsaI来切割，得到3`凹的粘性末端，然后再用T4 DNA聚合酶的3`-5`外切酶活性继续消化得到长的粘性末端。我现在想改用平端内切酶，比如EcoRV切割，不知道T4 DNA聚合酶在只有一种dNTP时，对平末端的双链DNA3-`5`的消化能力还有多强，足够做LIC克隆吗？
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为什么
1楼 2016-07-25 00:52:58
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
547star: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 谢谢！那就放心试试！ 2016-07-25 10:20:33
可以的，没有问题的。
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2楼2016-07-25 07:43:29
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547star

木虫 (著名写手)
脑子转不过来。PCR产物就是平末端双链，可以被作用。
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为什么
3楼2016-07-25 20:04:14
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