| 查看: 1892 | 回复: 9 | |||
[求助]
酶切后的tag free蛋白挂在镍柱上 已有2人参与
|
|
目标蛋白大小5kDa，蛋白可溶性表达，融合Sumo Tag，纯化后用含有His Tag的Sumo蛋白酶酶切，标签被切开，之后用Ni-IDA回收。 条件：上样Buffer：50mM Tris，300mM NaCl，20mM 咪唑，pH8.0 洗脱：50mM 100mM 500mM 咪唑梯度洗脱 结果：流出中没有目标蛋白，50mM和100mM咪唑洗脱液中有目标蛋白，但是也同时存在Sumo Tag 求各位大神帮帮忙，怎样得到我的tag free蛋白 |
回复此楼» 猜你喜欢
限项规定
已经有7人回复
-
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？
已经有4人回复
-
救命帖
已经有8人回复
-
招博士
已经有4人回复
-
西南交通大学国家级人才团队2026年博士研究生招生（考核制）—机械、材料、力学方向
已经有3人回复
-
英文综述是否需要润色及查重
已经有5人回复
-
为什么nbs上溴 没有产物点出现呢
已经有9人回复
-
最失望的一年
已经有18人回复
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
2楼2016-07-25 11:25:35
3楼2016-07-25 14:55:28
| . |
4楼2016-07-25 16:16:41
keke226
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 5322.2
- 散金: 95
- 红花: 9
- 帖子: 778
- 在线: 736.8小时
- 虫号: 2363805
- 注册: 2013-03-20
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
5楼2016-07-26 21:43:18
6楼2016-07-27 09:44:54
keke226
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 5322.2
- 散金: 95
- 红花: 9
- 帖子: 778
- 在线: 736.8小时
- 虫号: 2363805
- 注册: 2013-03-20
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
7楼2016-07-27 10:13:00
8楼2016-07-28 10:57:42
keke226
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 5322.2
- 散金: 95
- 红花: 9
- 帖子: 778
- 在线: 736.8小时
- 虫号: 2363805
- 注册: 2013-03-20
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
9楼2016-07-28 12:42:18
10楼2016-07-29 11:14:53