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酶切后的tag free蛋白挂在镍柱上 已有2人参与
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目标蛋白大小5kDa，蛋白可溶性表达，融合Sumo Tag，纯化后用含有His Tag的Sumo蛋白酶酶切，标签被切开，之后用Ni-IDA回收。 条件：上样Buffer：50mM Tris，300mM NaCl，20mM 咪唑，pH8.0 洗脱：50mM 100mM 500mM 咪唑梯度洗脱 结果：流出中没有目标蛋白，50mM和100mM咪唑洗脱液中有目标蛋白，但是也同时存在Sumo Tag 求各位大神帮帮忙，怎样得到我的tag free蛋白 |
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