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酶切后的tag free蛋白挂在镍柱上 已有2人参与
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目标蛋白大小5kDa，蛋白可溶性表达，融合Sumo Tag，纯化后用含有His Tag的Sumo蛋白酶酶切，标签被切开，之后用Ni-IDA回收。 条件：上样Buffer：50mM Tris，300mM NaCl，20mM 咪唑，pH8.0 洗脱：50mM 100mM 500mM 咪唑梯度洗脱 结果：流出中没有目标蛋白，50mM和100mM咪唑洗脱液中有目标蛋白，但是也同时存在Sumo Tag 求各位大神帮帮忙，怎样得到我的tag free蛋白 |
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3楼2016-07-25 14:55:28
hc-material
专家顾问 (职业作家)
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专家经验: +702 - BioEPI: 1
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2楼2016-07-25 11:25:35
keke226
铁杆木虫 (正式写手)
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- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
5楼2016-07-26 21:43:18
6楼2016-07-27 09:44:54
