应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 以切胶回收DNA为模版，再次pcr
141/2返回列表12下一页
查看: 3707  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)

[求助] 以切胶回收DNA为模版，再次pcr 已有3人参与

有以切胶回收DNA为模版，再次做pcr成功的朋友么，有没有什么要注意的？我做过几次以切胶回收为模板pcr，要么就是没有目的条带，要么就是完全拖带～求解救。

@biostar2009 @飞约疯人院 @youlinglyw @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-07-19 22:52:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寻找1

新虫 (正式写手)
我做过呀，很成功呀

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-07-19 23:18:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 寻找1 at 2016-07-19 23:18:24
我做过呀，很成功呀

请问有没有什么需要注意的？比如退火温度～？等等

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-07-19 23:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寻找1

新虫 (正式写手)
和之前一样

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2016-07-19 23:26:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寻找1 at 2016-07-19 23:26:43
和之前一样

我觉得我现在目的条带很淡，请问二次pcr的模版加多少啊，30微升的体系～

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-07-19 23:37:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是不是模板浓度高了，切胶回收后要稀释才能用吧
赞一下 回复此楼
想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
6楼2016-07-20 12:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feierorange

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
二次PCR，如果条带很亮的话，一般切胶回收的产物都需要稀释一下，如果完全拖带，可以考虑换个TOUCHDOWN的程序试试啊
赞一下 回复此楼
7楼2016-07-20 16:58:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
你需要将胶回收后的条带测序看是不是对的，有可能你的回收产物不对，测序现在挺便宜的，结果出来也快。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-07-20 20:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huxiangyu

铁虫 (小有名气)
没切胶的做一下对比吧，你这个很可能是切胶之后带了杂质

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
分子生物学专业，希望和大家深入交流
9楼2016-07-21 03:13:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半仙0356

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶回收的时候尽量切除无荧光的胶，洗涤时可以多洗涤一次，洗脱时少量多次原则，这样洗脱效率更高，做PCR之前去测一下回收DNA浓度和OD值，PCR这跟以前一样了，

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-07-21 08:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 丫头的格格巫 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] *O_o^ +3 jk31rb6vyz 2026-06-12 3/150 2026-06-14 09:08 by 8bmv3h4hvh
[找工作] *囍 +4 m584r2z4j3 2026-06-12 4/200 2026-06-14 09:06 by 8bmv3h4hvh
[论文投稿] ⊙▽⊙ +3 m584r2z4j3 2026-06-11 3/150 2026-06-14 08:46 by 8bmv3h4hvh
[硕博家园] T^T +7 m584r2z4j3 2026-06-11 8/400 2026-06-14 08:34 by 8bmv3h4hvh
[考博] →_→ +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-14 08:28 by 8bmv3h4hvh
[考博] T^T +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-14 08:26 by 8bmv3h4hvh
[考研] O(∩_∩)O +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 5/250 2026-06-14 08:23 by 8bmv3h4hvh
[硕博家园] O(∩_∩)O +6 jk31rb6vyz 2026-06-12 8/400 2026-06-14 08:10 by 8bmv3h4hvh
[考研] ╭(╯ε╰)╮ +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-14 08:03 by 8bmv3h4hvh
[基金申请] 函评 +3 布布和一二 2026-06-13 3/150 2026-06-13 23:35 by 芋圆香飘飘
[找工作] 售SCI文章，我:8.O.5.51O.5.4,科目齐全,可十急 +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 19:07 by 1js5n6upxm
[考研] T^T +6 m584r2z4j3 2026-06-11 6/300 2026-06-13 18:29 by lkmi35jdzt
[文学芳草园] 咸菜 +3 myrtle 2026-06-10 3/150 2026-06-13 18:29 by ahsoarli
[考博] π_π +4 m584r2z4j3 2026-06-11 4/200 2026-06-13 18:25 by lkmi35jdzt
[考研] o>_<o +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-13 18:22 by lkmi35jdzt
[考博] T^T +4 jk31rb6vyz 2026-06-12 4/200 2026-06-13 12:09 by 80j16ujcu8
[论文投稿] →_→ +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-13 08:13 by t4hz8376wy
[考博] [急招]吉林大学招收26年9月入学考核制博士生1名，截止今晚24点前 +3 hehejin 2026-06-10 4/200 2026-06-12 18:24 by 冻雨天
[基金申请] 前几天时间戳更新了 +8 vito刘 2026-06-11 13/650 2026-06-12 14:17 by BlakeReary
[考博] 博士申请 +3 张城斐 2026-06-07 3/150 2026-06-08 09:15 by A大朋同学
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭